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松鼠的资料精选(九篇)

松鼠的资料

第1篇:松鼠的资料范文

姬十三,原名嵇晓华,果壳网CEO、科学松鼠会创始人。

姬十三从小就是个乖学生,考试落到年级10名后会痛哭流涕,和女生说话会脸红,凡是老师吩咐的一定完成。他从小的梦想是做科学家。所以高考后填志愿选生物专业,2001年到2007年一直窝在复旦某个实验室里与白鼠为伍。

这个神经生物系的博士,从2004年开始向媒体投稿。那时,他的文笔以幽默见长,擅长将枯燥的科学知识用好玩的故事讲出来。

2007年,在写了三年的科学专栏后,临近博士毕业,姬十三面临对未来生活的重要选择。他可以拿着优秀的毕业论文,像大多数同学一样,申请出国读博士后。或者,他留下来,找个院校当副教授,或去外企当白领。他分别去一个事业单位和一个制药公司实习,但那两段经历并没有给他留下好印象,宅在实验室里彻底磨平了他对科学的激情,所有的选择都是“一眼可以望穿三五年之后的样子”,他觉得这是一件很恐怖的事情。最后,他决定不走寻常路,什么也不干,成为一名自由撰稿人。

毕业后的半年间,姬十三开始撰写科普文章,由于科普文章很小众,姬十三最初投稿无门,只得群发邮件给有限的几本科普杂志。不久这些科学小文章为他迅速赢得一大批粉丝。生活似乎也没那么糟糕,他一个月可以赚到将近一万元。但专栏作家当久了,他觉得这种生活仿佛没有尽头,他想酝酿更大的动作。

2008年,在一家书吧里,姬十三和几个科学发烧友一拍即合,组织一个供科学作者、译者、编辑和记者交流的小平台,起名松鼠会。希望自己能够像松鼠一样,打开科学的坚硬外壳,让人们领略到科学的美妙。姬十三曾搞过一次街拍,主题是“什么是科学”。回答五花八门,路人甲说:“发展观,科学发展观。”路人乙说:“科学是很高级的东西。”

这些落后的观念让姬十三坚定了信念,把科学普及到生活中。

一年后松鼠会发展为最火的民间科学组织。在2008年11月揭晓的德国之声全球博客大赛中,科学松鼠会荣膺“最佳国际博客”和“最佳中文博客”双料大奖。

最能体现这种趣味精神的是他们和读者共同打造松鼠会问答专栏Dr.You,即“问不倒先生”,每一个问题由读者抛出,再由读者解答,此外,每月都会举行“小姬看片会”活动。

但这些活动都是烧钱的活儿,科学松鼠会只是一个非盈利的公益组织。资金短缺一直是他们无可回避的问题。最初大家都有自己的工作,只是利用业余时间写作,操办线下活动,成员们都是义务劳动,随着活动越来越多,资金问题愈发严峻起来。

姬十三曾经想过将松鼠会变成公益性的非营利机构,争取社会的资金支持。但是公益组织要找挂靠单位,而大多数单位并不认可科普的公益性质。无奈之下,姬十三和几个股东凑了30万元资金,在2009年4月注册了一群松鼠文化传播公司。

目标很单纯:找钱维持松鼠会,出书、帮电视台策划科普节目、做企业社会责任报告。第一笔业务是给CCTV10绿色空间栏目组的科学节目做策划,这让松鼠会声名鹊起。期间也有出版社来跟他们谈合作,希望在新书上打上“科学松鼠会推荐”的标志。但姬十三最终拒绝。后来公司内部有股东希望利用松鼠会的品牌赚钱,姬十三意识到,再次“求变”不可避免。

第2篇:松鼠的资料范文

关键词:红腹松鼠;普通松鼠;体毛;超微结构;比较观察

中图分类号:S443.1 文献标识码:A DOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2013.03.011

红腹松鼠一般成体体长190~250 mm,尾大,其长等于或略大于体长。体背为橄榄黄色,毛基为灰黑色,毛端黑黄相问或全为黑色,故而可见细小的黑黄斑点。腹毛棕灰或棕黄色,毛基深灰色,毛尖浅棕色。尾毛背面与体背腹毛色泽相同,两颊及吻部色淡呈灰黄色,四肢内侧为赭色。

普通松鼠一般体长180~280 mm,尾长而蓬松,长135~240 mm,后足长49~70 mm,耳廓直立,长30~38 mm,冬季耳廓顶端的黑灰色毛簇极为显著。个体毛色差异较大。东北亚种(Sciurus vulgaris mantchuricus) 冬季体背面呈显著的灰色,带有细小暗波纹,很少暗褐色换黑褐色,尾部杂有少量赤色毛[1]。

毛是哺乳动物区别其他动物最主要的特征之一,它具有保护、调节体温、感觉和排泄功能。所有动物的毛都有其基本的形态和结构,而不同的动物,在毛的形态上又表现出很大的差异。毛的不同形态与其微观结构有着密不可分的关联[2]。电子显微镜的出现让人们对动物毛的形态与结构进行了广泛的研究[3-11],而对于松鼠毛的研究未见报道,本试验选取两种松鼠作为研究对象,用扫描电子显微镜对不同部位的毛进行观察,以期为松鼠种的鉴别和深入研究积累基础资料。

1 材料和方法

1.1 试验材料

红腹松鼠标本保存于牡丹江师范学院生物系生物标本馆, 2009年捕获于福建沧州,普通松鼠2010年捕获于大兴安岭地区,松鼠均为成体冬毛。分别取背部针毛、腹部针毛、尾部毛和触毛作为试验材料。

1.2 试验方法

将白猫牌洗洁精与蒸馏水按照1∶2的比例配制成清洗液, 将上述的毛样品浸泡2~4 h, 再用蒸馏水清洗干净, 这样浸洗2次, 晾干后, 再用无水乙醇浸泡2 h, 取出后放在滤纸上, 空气自然干燥。用导电胶带将样品固定在样品台上, 经SBC-12型离子溅射仪镀膜, 在日立S-4800型扫描电子显微镜下观察, 记录下灰度图像, 进行分析[7]。

2 结果与分析

红腹松鼠与普通松鼠毛的鳞片类型大致有以下7种:长瓣型、扁平型、杂片状、片块状、杂波型、冠状型、过渡型,但主要为长瓣型、扁平型、冠状型和杂片状4种类型。在种间存在一定的差异,同种间不同部位也存在差异。

2.1 背毛比较

松鼠的毛和其他哺乳动物的毛整体形态大致相同,分根段、中段和梢段,整体为梭形。红腹松鼠与普通松鼠背毛根部和梢部基本相同,根部是长瓣型,梢部是冠状型,排列较整齐,形状较规则,而红腹松鼠中段是杂波型,普通松鼠中段是扁平型(表1,图1)。总之,背毛主要以长瓣型为主,从根部到梢部排列顺序为:长瓣型、扁平型、杂波型、冠状型。

2.2 腹毛比较

红腹松鼠与普通松鼠腹毛差别比较大,只有梢部相同是冠状型,红腹松鼠根部和中段是瓣状型,非常明显,而普通松鼠根部为过渡型(扁平型向杂波型过度),中段是典型的扁平形。总之,腹毛以冠状形为主,从根部到梢部排列顺序为:长瓣型、短瓣型、过渡型、扁平型和冠状型(图2)。

2.3 尾毛比较

红腹松鼠与普通松鼠尾毛差别比较大,只有根部相同是扁平型,红腹松鼠中段和梢部都是杂片状,普通松鼠中段为瓣状型,而梢部是冠状型(图3)。

2.4 触毛比较

红腹松鼠与普通松鼠触毛差别不大,基本上都是杂片状(图4),因为触毛长在嘴的周边,是否与捕食相摩擦导致损伤有关还有待进一步研究。

3 讨 论

两种松鼠不同部位毛的形状不一,这可能与着生的部位不同有关,尾毛与触毛接触外物比较多,可能磨损程度不一,导致毛鳞片类型不同。毛梢部几乎均为冠状型,表明同种动物不同部位表面鳞片的类型及排列顺序具有一定的规律性,不同可能与存在变异有关,有待进一步研究。

通过两种松鼠间毛的形态观察发现,有些鳞片类型是相似的,是由种的遗传特性所决定的,是可遗传的,已有文献证明动物种间毛鳞片形态存在一定的差异,利用电镜分析毛的鳞片类型和排列方式,作为动物分类是可行的。但应注意采集毛的部位,因为不同部位的鳞片类型和排列顺序不同。不同季节同部位毛的鳞片类型是否不同需进一步研究。建立动物毛的电镜扫描数据库,应用图像处理系统进行分析、处理,在计算机的帮助下进行识别。

通过观察,成体冬季背毛的差别不大,腹毛的根部、尾毛的梢部差别较大,可以直接作为种间鉴别的特征。毛作为种间鉴别特征,对动物的伤害比较小或几乎没有,所以在濒危物种的保护与研究工作中兽毛受到越来越多的关注。因此,毛形态学研究仍然在实践中起到不可替代的作用,有关这方面的研究应继续受到关注并进一步探讨。

参考文献:

[1] 罗泽. 中国动物志 兽纲 第6 卷 啮齿目 下册 仓鼠科[M]. 北京: 科学出版社,2000:1-19.

[2] 侯森林,郭海涛,薛晓明. 4种鹿科动物被毛显微形态学特征研究[J]. 四川动物, 2008,27 (1): 102-104.

[3] 金志民,孙永义,杨春文,等.黑龙江省东南部林区啮齿动物对农林危害调查[J].天津农业科学2012,18(3):157-160.

[4] 郭全宝,赵俊萍.天津市东部农田害鼠及防治[J].天津农业科学,1983,3(2):26-30.

[5] 张德双,张凤兰,徐家炳,等.大白菜CMS96不育系和保持系电镜观察[J].华北农学报,2012,27(2):133-139.

[6] 胡焕民, 王晓华.正常人及胎儿头发的扫描电镜观察[J]. 解剖学报, 1986,17 (3) : 316-319.

[7] 王学信,郭勤娥.正常新疆维吾尔族人头发的扫描电镜观察[J]. 解剖学杂志, 1992,15 (5) : 373-375.

[8] 张晓军, 杨春文.三种鼠针毛表面超微结构的比较研究[J]. 动物分类学报, 2004,29 ( 4 ): 653-657.

[9] 孙中武,高海钰,毕冰,等.鹿类动物毛的扫描电镜分析[J]. 东北林业大学学报, 2003,31 (4):29-32.

第3篇:松鼠的资料范文

只做线上销售

2012年,三只松鼠赢得了150万美元的天使投资,开始向森林食品品牌迈进。所有的产品都被归为“森林系”,倡导“慢食快活”的生活方式。

Tips:森林食品是指来自森林,符合人类自然、环保、清洁生产技术要求,生态、优质、健康、营养的食用林产品。

不专做坚果类,这是创始人章燎原认定的一大原则:“我们是做多品类的纯互联网森林食品品牌。”目前,三只松鼠的核心产品还是坚果类,但下一步店铺会有花茶、蜜饯等茶叶干果类产品上线。

章燎原认为,营销定位的根本在于你背后支持定位灌输的资源有多少。如果已有的资源只够做好一个坚果类,那就老老实实聚焦坚果,如果资源充足,就能够支撑多品类。

此外,三只松鼠只做线上销售。在章燎原看来,电子商务的本质是零售,电子只是手段,线上和线下正在走向融合,但主体不同,会导致融合的结果不同。“线上为主体融合线下”和“线下为主体融合线上”的基因和结构是不同的。三只松鼠的主体一定是线上。

具体来讲,线上企业有很多后发优势,一切的搭建和重构定位会较高;而线下企业在走向融合的时候,必然有很多线下资源的掣肘。

为了不背上传统企业的包袱,三只松鼠将品牌目标人群锁定为爱网上购物的80后、90后,这同时就要求品牌要做到完全的互动化,并依照目标客户的喜好去打造产品和品牌形象。为此,三只松鼠选择了森林绿和高端黑作为店铺的主打色,在他们看来,黑色显高贵,绿色是对产品的暗喻,和产品健康绿色的定位相符。

多条腿支撑快跑

品牌方面,建立独树一帜的形象体系,在多个接触点(如微博、旺旺、自有杂志等)利用松鼠的形象与消费者近距离沟通;速度方面,如何更快提高坚果从树枝到消费者客厅的速度、提高消费者从购买到收货的速度――追求速度就是在追求产品的新鲜和优秀的消费体验;服务,如何做到个性化――基于大数据的收集和挖掘,充分了解消费者,从而做到更个性化的服务;品质,如何让坚果更好吃。

在产品控制上统一采取订单式合作:在产品原产地收购原材料后,委托当地企业生产加工成半成品,并将合格的半成品送回位于芜湖总部的封装工厂或冷库中,完成最后的分装工作,最大限度地保证产品的新鲜。

尝试运用大数据的方法,通过后台数据,三只松鼠可以掌握顾客购买的客单价、购买频率、购买内容、购买打折商品的比例等信息。有了这些信息,价格制定、产品组合、促销活动等可以更有针对性,和目标人群的粘性加强。

此外,“三只松鼠”不仅把产品加工得易剥,双层包装,突出松鼠形象,而且在它的包裹里还会提供纸袋夹子,以便吃到一半好进行袋子的密封。还有垃圾袋、纸巾、微杂志等等,吃坚果的工具基本上都能在这个包裹里找到。

如何应对竞争?

目前领先的电商品牌都绕不开两类竞争对手:一为“高富帅”,即进入电商的传统品牌大佬,实力超群,招募豪华团队,甚至四处挖人,有品牌、资金、人才优势,而且也很勤奋。

如何与“高富帅”竞争?首先是专业团队。虽然大佬们招募的是豪华团队,但是也毕竟处于初始阶段,电商最多只是一个部门,多是职业经理人带队,与一个全情投入的老板带领一群火热激情近乎“疯子”的团队相比,后者不一定处于弱势。

其次是定价。传统品牌有大量的线下经销商,所以价格无法像纯线上企业那样无所顾虑,而三只松鼠这样的线上企业可以快速捕捉短周期内的消费趋势变化,并快速做出反应和调整。

最后是产品。三只松鼠积累了大量的消费者数据,可以根据数据分析来设计产品,迎合网购人群的需要(核心网购人群和线下购买人群的购物心理和习惯有明显差别)。而传统品牌企业的产品,首先要考虑占自己销售体量绝大部分的线下人群,就算偶有为线上设计的专款,(如李宁为线上设计的“”鞋等),也只是昙花一现,偶尔为之。

另一类竞争人群可以称为“丝”,就是别人做什么他就抄什么,死缠烂打。别人前期花了大量的时间、人力和资金研发出的新品,刚卖了没几天,他就开始同款且低价跟随。别人不敢轻易降价,因为前期的研发成本摆在那里,降价肯定亏;“丝”降价,正好抢了客户。这样下去,差不多不到半年,这一市场就被杀成红海乱象。

第4篇:松鼠的资料范文

作者:李平 程建峰 陈东鸿 贺建荣 藤树宝 仲崇华 刁亚英 贺平

【关键词】 地塞米松

关键词: 地塞米松;苯巴比妥钠;利多卡因;肝P4503A酶;小鼠

摘 要:目的 研究地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因预处理的昆明种小鼠P4503A酶有无诱导作用及其作用机制. 方法 给昆明种小鼠腹腔注射常用量地塞米松、苯巴比妥钠或利多卡因1wk后,观察MEGX累积排泄量、P4503A酶蛋白含量及其mRNA表达的改变. 结果 与正常对照组相比,地塞米松组小鼠MEGX累积排泄量增加35.0%(P

Keywords:dexamethasone;phenobarbital;lidocaine;hepatic P4503A enzyme;mice

Abstract:AIM To study the induction of dexamethasone,phenobarbital and lidocaine on hepatic P4503A enzyme in Kunming mice.METHODS After administering ip a non-toxic dose of dexamethasone,phenobarbital or lidocaine to Kunming mice for7d,the urinary recovery of MEGX,a spe-cial lidocaine metabolite catalyzed by hepatic P4503A en-zyme,the content of hepatic P4503A enzyme and its mRNA expression were analyzed by TDX,ELISA and RT-PCR techniques.RESULTS In comparison with mice as control,the urinary recovery of MEGX increased by35.0%and23.4%(P

0 引言

地塞米松和苯巴比妥钠是经典的肝微粒体P450氧化酶诱导剂,对人体及多种实验动物肝药酶具有诱导作用.但是,近年来的研究发现,在不同实验动物,甚至是同一动物的不同种系,其诱导作用不尽相同.另外,肝药酶诱导剂的作用机制在不同动物也不相同,有的在转录水平,有的则在转录后水平,或者只是改变原有酶蛋白的空间构象,影响其活性[1] .

P4503A酶是肝脏中含量最丰富的P450形式,可高达P450总量的60%.主要通达C-或N-脱烃、C-羟化反应,参与药物、毒物和致癌物的代谢.绝大多数有首过效应药物的代谢涉及P4503A酶[2] ,利多卡因代谢产物单乙基甘胺酰二甲苯胺(MEGX)是P4503A酶的特异性代谢产物[3] ,但是,利多卡因、地塞米松和苯巴比妥钠对昆明种小鼠肝P4503A酶有无诱导作用,机制何在,未见报道.我们采用利多卡因试验、肝P4503A酶含量及其mRNA表达为指标,研究了地塞米松、利多卡因和苯巴比妥钠对昆明种小鼠肝微粒体P4503A酶的诱导作用及其作用机制.

1 材料和方法

1.1 材料 苯巴比妥钠,上海新亚药业公司生产,批号9501121;利多卡因,上海旭东海普药业有限公司生产,批号9802022;甘草酸,江苏天晴制药厂生产,批号9608071;CYP4503A酶ELISA试剂盒,购于Amer-sham Pharmacia Biotech UR公司;PCR试剂盒,购于MRI公司;柱离心式胶回收试剂盒,购于华顺生物试剂公司;MEGX第二军医大学药学院药化教研室李克教授馈增;PCRmark,购于华美生物工程公司,其余试剂均为国产分析纯或优级纯.P/ACE5000型毛细管电泳仪,美国Beckman公司制造;GA2400型PCR仪,PE公司制造;EL-808型酶标仪,美国Bio-Tek公司制造;SCR-300型电泳仪,上海万达生物工程公司制造;ZF-1型紫外透射分析仪,上海长明电子仪器厂生产.昆明种小白鼠,雄性,体质量(20±2.0)g,购于中科院上海实验动物中心,清洁级,证书号:005.给予标准化光照及饮食.毛细管:长57cm,有效长度50cm,直径59μm;电解液;50mmol L-1 硼酸缓冲液(pH=8.4);电压:1500V;电流:9.4~11.6μA;温度:23℃;检测波长:214nm;内标:氨茶碱.

1.2 方法

1.2.1 利多卡因试验 小鼠36只,随机分成4组,每组9只.A组给予2g L-1 苯巴比妥钠0.5mL,B组给予0.8g L-1 利多卡因注射液0.5mL,C组给予0.2g L-1 地塞米松0.5mL;D组为正常对照组,给予等量生理盐水,ip,1次/d.连续诱导1wk后,ip2g L-1 利多卡因40mg kg -1 ,将小鼠置于玻璃代谢笼中,收集5h尿液.测量尿液体积后,-20℃保存.解剖肝脏,分成二等份,-80℃保存.取尿液0.2mL,加0.1mol L -1 醋酸钠缓冲液(pH=5.0)0.18mL,8.33g L-1 氨茶碱10μL和β葡萄糖醛酸-硫酸酶20μL,37℃反应18h.加甲醇0.2mL,10000g离心15min,取上清液,高效毛细管电泳测定MEGX含量.

1.2.2 小鼠肝微粒体P4503A酶含量测定 取-80℃保存的肝组织0.30g,加TMS缓冲液1.7mL,匀浆,10000g离心15min;取上清液,加适量TMS,100000g,4℃,离心60min;取沉淀,加TMS缓冲液后,匀浆,1mL含肝组织0.1g,-20℃保存.用CYP4503A ELISA试剂盒测定P4503A酶蛋白的含量.

1.2.3 小鼠肝P4503A酶mRNA表达研究 取-80℃保存的小鼠肝组织约0.5g,用文献报道方法[4] ,抽提肝细胞总mRNA,逆转录cDNA,PCR扩增目的片段.20g L-1 琼脂糖电泳,紫外透射仪下比较0.7kb条带的亮度,并回收该片段.用PST1限制 性内切酶酶解,再次20g L-1 琼脂糖电泳后,观察0.7kb的条带是否被分解成300和400bp的二条带.

统计学处理:所有定量资料用x ±s表示,采用单因素方差分析和Duncan法组间两两比较,进行显著性检验.

2 结果

经地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因预处理1wk后,地塞米松组和苯巴比妥钠组小鼠5h尿液中MEGX累积排泄量和肝微粒体P4503A酶含量明显增加,与正常对照组相比,差别显著(P

表1 地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因预处理对昆明种小鼠MEGX和P4503A酶含量的影响 略

图1 略

3 讨论

MEGX是肝微粒体P4503A酶的特异性代谢产物.腹腔或静脉注射利多卡因后,其经血流至肝脏,在肝微粒体混合功能氧化酶3A催化下,氧位去乙基,生成MEGX,然后经肾脏排出体外.因此,小鼠腹腔注射利多卡因后,测定比较尿液中MEGX含量,能反映小鼠肝微粒体P4503A酶的活性.

图2 略

苯巴比妥钠和地塞米松作为诱导剂,在肝药酶研究中应用十分广泛[5] .但用于昆明种小鼠,研究肝微粒体P4503A酶活性和基因表达,作者未见有文献报道.我们分别用地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因进行预处理,研究其对昆明种小鼠利多卡因代谢、P4503A酶蛋白含量及其mRNA表达的影响.实验结果显示,与正常对照组相比,利多卡因组小鼠MEGX累积排泄量和P4503A酶蛋白含量均无明显改变,说明利多卡因不是昆明种小鼠P4503A酶诱导剂,无代谢自诱导作用,苯巴比妥钠使昆明种小鼠尿液中MEGX含量增加23.4%,肝P4503A酶含量增加43.6%.地塞米松预处理后,尿液MEGX累积排泄量增加35.0%,P4503A酶含量增加147.1%.上述结果表明,地塞米松和苯巴比妥钠能促进昆明种小鼠对利多卡因的代谢,其诱导作用不仅是增强P4503A酶的活性,而且增加了肝微粒体P4503A酶蛋白的含量.

另外,实验结果还表明,昆明种小鼠在非诱导状态下,其P4503A酶mRNA呈高表达,无论使用地塞米松还是苯巴比妥钠诱导,其mRNA表达并不增加,说明地塞米松与苯巴比妥钠对昆明种小鼠P4503A酶的诱导作用在转录后水平.

参考文献

[1]Frank J G.Molecular genetics of the P-450superfamily [J].Pharm Ther,1990;45:1-38.

[2]Ju MH,Li Y.Effects of cytochrome P-450isoenzyme in the metabolism course of exogenous [J].Guowai Yixue Yaoxue Fence(For Med Sci Pharm),1998;25(4):218-224.

[3]Reichel C,Nacke A,Sudhop T,Wienkoop G.The low-dose monoethylglycinexylidide test [J].Hepatology,1997;25(6):1323-1327.

[4]Goodwin B,Liddle C,Murray M.Effects of metyrapone on ex-pression of Cyps2C11,3A2and other3A,genes in rat hepato-cytes cultured on matrigel [J].Biochem Pharm,1996;52(2):219-227.

[5]Nelson DR.Koymans L,Kamatahi T.P450superfamily,up-date in new sequences,gene mapping,accession numbers and nonenclature [J].Pharmacogenetics,1996;6(1):1-42.

编辑 王小仲

1 第四军医大学唐都医院药学部,陕西西安710038,

2 第二军医大学东方肝胆外科研究所,上海200438

作者简介: 李 平(1952-),女(汉族),黑龙江省呼兰县人.副主任药师.Tel.(029)3577716 研究原著

地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因对昆明种小鼠肝P4503A酶的影响

李平 程建峰 陈东鸿 贺建荣 藤树宝 仲崇华 刁亚英 贺平

关键词: 地塞米松;苯巴比妥钠;利多卡因;肝P4503A酶;小鼠

摘 要:目的 研究地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因预处理的昆明种小鼠P4503A酶有无诱导作用及其作用机制. 方法 给昆明种小鼠腹腔注射常用量地塞米松、苯巴比妥钠或利多卡因1wk后,观察MEGX累积排泄量、P4503A酶蛋白含量及其mRNA表达的改变. 结果 与正常对照组相比,地塞米松组小鼠MEGX累积排泄量增加35.0%(P

Keywords:dexamethasone;phenobarbital;lidocaine;hepatic P4503A enzyme;mice

Abstract:AIM To study the induction of dexamethasone,phenobarbital and lidocaine on hepatic P4503A enzyme in Kunming mice.METHODS After administering ip a non-toxic dose of dexamethasone,phenobarbital or lidocaine to Kunming mice for7d,the urinary recovery of MEGX,a spe-cial lidocaine metabolite catalyzed by hepatic P4503A en-zyme,the content of hepatic P4503A enzyme and its mRNA expression were analyzed by TDX,ELISA and RT-PCR techniques.RESULTS In comparison with mice as control,the urinary recovery of MEGX increased by35.0%and23.4%(P

0 引言

地塞米松和苯巴比妥钠是经典的肝微粒体P450氧化酶诱导剂,对人体及多种实验动物肝药酶具有诱导作用.但是,近年来的研究发现,在不同实验动物,甚至是同一动物的不同种系,其诱导作用不尽相同.另外,肝药酶诱导剂的作用机制在不同动物也不相同,有的在转录水平,有的则在转录后水平,或者只是改变原有酶蛋白的空间构象,影响其活性[1] .

P4503A酶是肝脏中含量最丰富的P450形式,可高达P450总量的60%.主要通达C-或N-脱烃、C-羟化反应,参与药物、毒物和致癌物的代谢.绝大多数有首过效应药物的代谢涉及P4503A酶[2] ,利多卡因代谢产物单乙基甘胺酰二甲苯胺(MEGX)是P4503A酶的特异性代谢产物[3] ,但是,利多卡因、地塞米松和苯巴比妥钠对昆明种小鼠肝P4503A酶有无诱导作用,机制何在,未见报道.我们采用利多卡因试验、肝P4503A酶含量及其mRNA表达为指标,研究了地塞米松、利多卡因和苯巴比妥钠对昆明种小鼠肝微粒体P4503A酶的诱导作用及其作用机制.

1 材料和方法

1.1 材料 苯巴比妥钠,上海新亚药业公司生产,批号9501121;利多卡因,上海旭东海普药业有限公司生产,批号9802022;甘草酸,江苏天晴制药厂生产,批号9608071;CYP4503A酶ELISA试剂盒,购于Amer-sham Pharmacia Biotech UR公司;PCR试剂盒,购于MRI公司;柱离心式胶回收试剂盒,购于华顺生物试剂公司;MEGX第二军医大学药学院药化教研室李克教授馈增;PCRmark,购于华美生物工程公司,其余试剂均为国产分析纯或优级纯.P/ACE5000型毛细管电泳仪,美国Beckman公司制造;GA2400型PCR仪,PE公司制造;EL-808型酶标仪,美国Bio-Tek公司制造;SCR-300型电泳仪,上海万达生物工程公司制造;ZF-1型紫外透射分析仪,上海长明电子仪器厂生产.昆明种小白鼠,雄性,体质量(20±2.0)g,购于中科院上海实验动物中心,清洁级,证书号:005.给予标准化光照及饮食.毛细管:长57cm,有效长度50cm,直径59μm;电解液;50mmol L-1 硼酸缓冲液(pH=8.4);电压:1500V;电流:9.4~11.6μA;温度:23℃;检测波长:214nm;内标:氨茶碱.

1.2 方法

1.2.1 利多卡因试验 小鼠36只,随机分成4组,每组9只.A组给予2g L-1 苯巴比妥钠0.5mL,B组给予0.8g L-1 利多卡因注射液0.5mL,C组给予0.2g L-1 地塞米松0.5mL;D组为正常对照组,给予等量生理盐水,ip,1次/d.连续诱导1wk后,ip2g L-1 利多卡因40mg kg -1 ,将小鼠置于玻璃代谢笼中,收集5h尿液.测量尿液体积后,-20℃保存.解剖肝脏,分成二等份,-80℃保存.取尿液0.2mL,加0.1mol L -1 醋酸钠缓冲液(pH=5.0)0.18mL,8.33g L-1 氨茶碱10μL和β葡萄糖醛酸-硫酸酶20μL,37℃反应18h.加甲醇0.2mL,10000g离心15min,取上清液,高效毛细管电泳测定MEGX含量.

1.2.2 小鼠肝微粒体P4503A酶含量测定 取-80℃保存的肝组织0.30g,加TMS缓冲液1.7mL,匀浆,10000g离心15min;取上清液,加适量TMS,100000g,4℃,离心60min;取沉淀,加TMS缓冲液后,匀浆,1mL含肝组织0.1g,-20℃保存.用CYP4503A ELISA试剂盒测定P4503A酶蛋白的含量.

1.2.3 小鼠肝P4503A酶mRNA表达研究 取-80℃保存的小鼠肝组织约0.5g,用文献报道方法[4] ,抽提肝细胞总mRNA,逆转录cDNA,PCR扩增目的片段.20g L-1 琼脂糖电泳,紫外透射仪下比较0.7kb条带的亮度,并回收该片段.用PST1限制 性内切酶酶解,再次20g L-1 琼脂糖电泳后,观察0.7kb的条带是否被分解成300和400bp的二条带.

统计学处理:所有定量资料用x ±s表示,采用单因素方差分析和Duncan法组间两两比较,进行显著性检验.

2 结果

经地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因预处理1wk后,地塞米松组和苯巴比妥钠组小鼠5h尿液中MEGX累积排泄量和肝微粒体P4503A酶含量明显增加,与正常对照组相比,差别显著(P

表1 地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因预处理对昆明种小鼠MEGX和P4503A酶含量的影响 略

图1 略

3 讨论

MEGX是肝微粒体P4503A酶的特异性代谢产物.腹腔或静脉注射利多卡因后,其经血流至肝脏,在肝微粒体混合功能氧化酶3A催化下,氧位去乙基,生成MEGX,然后经肾脏排出体外.因此,小鼠腹腔注射利多卡因后,测定比较尿液中MEGX含量,能反映小鼠肝微粒体P4503A酶的活性.

图2 略

苯巴比妥钠和地塞米松作为诱导剂,在肝药酶研究中应用十分广泛[5] .但用于昆明种小鼠,研究肝微粒体P4503A酶活性和基因表达,作者未见有文献报道.我们分别用地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因进行预处理,研究其对昆明种小鼠利多卡因代谢、P4503A酶蛋白含量及其mRNA表达的影响.实验结果显示,与正常对照组相比,利多卡因组小鼠MEGX累积排泄量和P4503A酶蛋白含量均无明显改变,说明利多卡因不是昆明种小鼠P4503A酶诱导剂,无代谢自诱导作用,苯巴比妥钠使昆明种小鼠尿液中MEGX含量增加23.4%,肝P4503A酶含量增加43.6%.地塞米松预处理后,尿液MEGX累积排泄量增加35.0%,P4503A酶含量增加147.1%.上述结果表明,地塞米松和苯巴比妥钠能促进昆明种小鼠对利多卡因的代谢,其诱导作用不仅是增强P4503A酶的活性,而且增加了肝微粒体P4503A酶蛋白的含量.

另外,实验结果还表明,昆明种小鼠在非诱导状态下,其P4503A酶mRNA呈高表达,无论使用地塞米松还是苯巴比妥钠诱导,其mRNA表达并不增加,说明地塞米松与苯巴比妥钠对昆明种小鼠P4503A酶的诱导作用在转录后水平.

参考文献

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[3]Reichel C,Nacke A,Sudhop T,Wienkoop G.The low-dose monoethylglycinexylidide test [J].Hepatology,1997;25(6):1323-1327.

第5篇:松鼠的资料范文

张球正在发呆,王溜已经大声尖叫起来了:“你看,它在捕捉苍蝇呢?”

森林里腐烂的树叶很多,到处是苍蝇嗡嗡叫着的声音。大松鼠没有理会树上的松果,伸出手掌对着苍蝇一抓一拍,苍蝇就被粘在手掌上,送到嘴边,伸出舌头舔了起来。

松鼠的举动让张球和王溜感到震惊了,为什么会这样?

小心翼翼地绕过大松鼠,他们继续往下走,这时,一只小猴子出现在了,猴子是袖珍型的,长得居然只有拳头大小,和老鼠差不多大,更奇特的是,它的背上还长了对形状怪异的翅膀,偶尔在空中扇动了几下翅膀就掉落了下来!猴子不会爬树了。

“难道这座森林受到了魔法的诅咒?”张球说。

“魔法?你觉得这是个童话世界吗?”王溜说,“肯定是环境污染造成动物们的变异。”

正在他们讨论着,从远处走来两只长颈鹿。张球觉得自己在动物园里看到的长颈鹿已经够高大了,可是和这两只长颈鹿比起来,还只能算是小鹿。长颈鹿的脖子太高了,比森林里最高大的树都要高,它们想吃树上的果实,却不可能了,跪着腿,弯着脖子,才啃到几片树叶。

第6篇:松鼠的资料范文

[关键词] 重组人甲状旁腺素1-34;骨质疏松症;骨密度;骨转换指标

[中图分类号] R580[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210(2014)06(b)-0017-04

Effect of human parathyroid hormone (hPTHl-34) on osteoporosis of ovariectomized rats

CHEN Bo1 LI Cuiqiong1 ZHU Changqing1 LI Wanmei1 CAO Xiaozhen2

1.Department of Endocrinology, the 12th People′s Hospital of Guangzhou City, Guangdong Province, Guangzhou 510620, China; 2.Department of Ultrasonography, the 12th People′s Hospital of Guangzhou City, Guangdong Province, Guangzhou 510620, China

[Abstract] Objective To investigate the effects of human parathyroid hormone (hPTHl-34) on the osteoporosis of ovariectomized rats. Methods 50 female 7-month-old SD rats were used for this experiment and 30 of them were ovariectomized and another 20 received sham operation. After 12 weeks of ovariectomy the osteoporosis model was confirmed by use of 10 ovariectomized and sham-operated rats. The osteoporotic rats of 20 were randomly divided into 2 treatment groups: hPTHl-34 and OVX placebo groups with 10 rats in each group, the other 10 rats were sham-operated as the control for SHAM group. Totally hPTHl-34 (20 μg/kg) were subcutaneous injected into the rats of hPTHl-34 group once every other day. The rats of the OVX placebo group and SHAM group were injected with 0.5 mL saline once every other day. The bone mineral density (BMD), serurn Ca, P, bone alkaline phosphatase (BALP), serum tartrate-resistant acid phosphatase 5b (Trap-5b) were measured after 3 months therapy. Results After 12 weeks′treatment the femoral and lumbar BMD in the hPTHl-34 group increased obviously compared with those of OVX placebo group [(0.151±0.008) g/cm2 vs (0.135±0.013) g/cm2, (0.181±0.010) g/cm2 vs (0.159±0.008) g/cm2, P < 0.01]. After treated with hPTHl-34 serum Ca, P, BALP and Trap-5b significantly increased compared with those of OVX placebo group (P < 0.05 or P < 0.01). There was no significant difference in hPTHl-34 and SHAM groups. Conclusion hPTHl-34 can stimulate osteoblast activity, inhibite bone resorption, promote bone mass effect and is effective on protection against osteoporosis.

[Key words] Human parathyroid hormone; Osteoporosis; Bone mineral density; Bone turnover markers

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种全身性骨病,以骨量减少和骨的微结构破坏为特征,使骨的脆性增加,并易发生骨折[1],严重影响患者的生活质量。而长期卧床又可加重骨质疏松,并引发其他心肺疾患以致形成恶性循环,甚至造成死亡,给患者、家庭和社会都带来了沉重的社会及经济负担。随着老龄化社会的到来,骨质疏松症发病率逐年增长,据统计2005年美国有近250万人次因骨质疏松性骨折就诊,有43.2万患者因此入院,约18万患者需要家庭护理[2],目前全球约有2亿患者,中国约9千万患者[3],已经成为全球所面临的重要健康问题。通常临床上以骨密度(BMD)作为诊断和评价药物疗效的指标,由于BMD是通过测量骨质量反应骨质疏松的情况,作为疗效评价指标存在一定的滞后性,不能对患者治疗中骨代谢情况进行有效监测。2011年美国临床内分泌学会制定的绝经后妇女骨质疏松诊断及治疗指南中提出,骨转换指标可以为骨折风险预测和疗效监测提供及时有效的信息[4]。近年来,国外研究表明,小剂量间歇性皮下注射重组人甲状旁腺素1-34(hPTH1-34)对松质骨有合成作用,但对皮质骨骨量和骨质量是否有影响及有何种影响尚存在争议[5]。本研究观察了低剂量、间歇性皮下注射hPTH1-34对去卵巢大鼠股骨和腰椎BMD、血清生化指标钙、磷及骨转换指标如骨源性碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(Trap-5b)的影响,初步探讨了其作用机制,为hPTH1-34治疗绝经后骨质疏松提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 造模及分组

选择7个月龄,体重(280±20)g,雌性,清洁级SD大鼠,由广东省医学实验动物中心提供,共50只。购置动物后适应1周分别进行去卵巢(OVX)和假手术(SHAM)。在无菌条件下,将5%氯胺酮注射液按100 mg/kg体重给大鼠作腹腔注射麻醉,取腰椎两旁切口进入腹腔背侧,在双侧肾脏下方脂肪组织内确认卵巢后,完整切除卵巢,术后腹腔内滴入3%过氧化氢,止血缝合,伤口酒精消毒[6]。SHAM组麻醉与手术方法均相似,保留卵巢,仅切除少许脂肪。大鼠给于标记后每5只一组分笼饲养,饲养环境温度为(25±3)℃,取12 h昼夜照明节律,相对湿度58%的环境,普通大鼠标准饲料喂养(钙含量1.33%,磷含量0.95%),自由饮水。有死亡大鼠立即造模补充,并相应延长补充大鼠的饲养时间。术后12周随机取SHAM组和OVX组各10只,放血处死时均检查双侧卵巢是否完全切除和子宫是否萎缩,取腰椎做BMD测定,确认骨质疏松模型建立后进行实验分组。共分为3个组:OVX安慰剂组(摘除大鼠双侧卵巢12周后不作任何处理,12周时与相邻组同时测BMD)、hPTH1-34治疗组(摘除大鼠双侧卵巢12周时测BMD后用hPTH1-34治疗12周),SHAM组(仅切除卵巢周围的脂肪组织约3 g,术后12周时测BMD)。

1.2药物治疗的途径和方法

hPTH1-34治疗组给予hPTH1-34(购于上海吉尔生化有限公司,批号:20130215,纯度>95%),治疗剂量为20 μg/kg,皮下注射,每周注射3次,连续12周;OVX安慰组和SHAM组皮下注射0.5 mL生理盐水,每周注射3次,连续12周。所有实验动物均服钙尔奇12 mg/(kg・d)和2.5 U维生素D3,连服12周。每周测量体重,根据体重变化调整药物剂量。各组动物于治疗后12周,用3%戊巴比妥钠麻醉,心脏采血取血标本,采用颈椎脱臼法处死去除软组织,剥离腰椎段脊柱L1~6和右侧股骨保存,用生理盐水纱布包裹维持湿度,塑料袋密封后置于-70℃低温冰箱中保存标本,以备BMD检测。

1.3 观察项目与方法

1.3.1 BMD测定应用双能X线吸收法BMD测定仪(美国GE Lunar Prodigy公司生产)进行测定全身、腰椎段脊柱L1~6和右侧股骨BMD。将标本相当于仰卧位放置于BMD仪探头下,应用附带的小动物软件对其进行扫描得出BMD值。大鼠照射范围:扫描长度为30.492 cm,扫描密度为17.912 cm,点分辨能力为0.0640 cm,精确度(CV) < 1%。结果以g/cm2表示。

1.3.2 生化指标测定三组大鼠全血5 mL离心分离血清,以美国Beckman公司的CX7全自动生化分析仪立即测定血钙、血磷及BALP含量。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测量血清Trap-5b,试剂盒购自芬兰SBA公司,批内差异3.0%,批间差异3.4%,该试剂盒只检测新鲜释放入血的具有酶活性的Trap-5b分子,在酶标仪上405 nm波长下读取吸光度,标准品及样品均行双管测定,结果取两次平均值,单位为U/L[7]。

1.4统计学方法

采用统计软件SPSS 13.0对实验数据进行分析,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,采用t检验。计数资料以率表示,采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大鼠骨质疏松模型鉴定

大鼠的腰椎和股骨远端富含松质骨,股骨干富含皮质骨,OVX后骨质疏松症模型是否建立主要以子宫湿重和松质骨的BMD来判断。OVX组双侧卵巢摘除12周后,子宫湿重较SHAM组明显下降,差异有高度统计学意义(P < 0.01),股骨、腰椎BMD较SHAM组明显下降,差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01),表明骨质疏松模型造模成功,见表1。

2.2 hPTH1-34对骨质疏松大鼠股骨、腰椎BMD的影响

OVX安慰剂组大鼠股骨、腰椎BMD较SHAM组明显降低差异有统计学意义(P < 0.05)。hPTH1-34组治疗12周后,与OVX安慰剂组比较,治疗组的股骨、腰椎BMD明显升高,差异有高度统计学意义(P < 0.01,但与SHAM组比较差异无统计学意义(P > 0.05)。见表2。

表2 hPTH1-34对骨质疏松大鼠股骨、腰椎BMD的影响(g/cm2,x±s)

注:与OVX安慰剂组比较,*P < 0.05,#P < 0.01;BMD:骨密度

2.3 hPTH1-34对骨质疏松大鼠生化指标的影响

OVX安慰剂组大鼠血清钙、磷、ALP、Trap-5b值较SHAM组明显低。治疗12周后,与OVX安慰剂组比较,hPTH1-34 治疗组的血清钙、磷、ALP、Trap-5b值明显升高(P < 0.05或P < 0.01),但与SHAM组相比差异无统计学意义(P > 0.05)。见表3。

表3 重组人甲状旁腺素1-34对骨质疏松大鼠

生化指标水平的影响(x±s)

注:与OVX安慰剂组比较,*P < 0.05,#P < 0.01;BALP:骨源性碱性磷酸酶;Trap-5b:抗酒石酸酸性磷酸酶-5b

3 讨论

甲状旁腺素是甲状旁腺主细胞分泌的一种激素,含有34个氨基酸残基,是调节钙磷代谢的主要激素之一。hPTH1-34与天然甲状旁腺素氨基酸结构完全一致,具有相同的受体亲和力和生理作用,可以通过增加成骨细胞及破骨细胞数目,促进骨吸收及生长,刺激骨松质层和骨皮质层的新骨形成效应,改善骨小梁微结构,增加骨量、BMD和骨强度[8]。2002年12月美国FDA和欧洲批准了PTH应用于临床治疗绝经后和男性骨质疏松症。目前认为,PTH对骨代谢具有双向调节作用:持续升高的PTH能通过骨钙入血,维持血钙水平,最终骨量减少;治疗作用表现在有计划、小剂量、间断给予PTH可显著促进骨形成[9]。

绝经后骨质疏松症动物模型于1969年首先由Saville通过切除大鼠卵巢来建立,后被反复证实并被广泛采用,目前已成为标准化的公认的绝经后骨质疏松症病理模型。文献报道SD雌鼠去卵巢至12周左右骨质疏松症病理模型能够复制成功[10]。笔者在实验中术后12周成功制作去卵巢大鼠骨质疏松症模型,认为造模因素单一,模型确定,重复性好,实验结果可信度大。骨强度的大小除了与骨结构有关外,更主要的是与骨量相关,骨强度的60%~80%都是由骨量来决定的,骨量与骨强度成正比例关系,而BMD是全面评价骨量和诊断骨质疏松症的可靠指标,也是衡量临床骨质疏松症治疗效果的评价指标[11]。在本研究中笔者发现hPTH1-34治疗组股骨和腰椎BMD较OVX安慰剂组明显升高,且以松质骨为主的腰椎BMD升高率较皮质骨为主的股骨更加明显(P < 0.01或P < 0.05),与SHAM组无差异,提示了hPTH1-34治疗不仅能保护松质骨骨量,阻挡松质骨骨量的继续丢失,预防骨质疏松症的进一步加重,而且明显加重和恢复已丢失的骨量,使松质骨骨量达到了正常水平。

由于骨骼由生理变化反应到BMD的变化存在着滞后性,以BMD作为疗效观察指标敏感性和时效性均较差,临床中需要快速、灵敏及有效的检测指标用于原发性骨质疏松症的疗效监测。雌激素减少后,骨转化增加,骨吸收大于骨形成,导致骨量的丢失,血液中骨代谢指标能敏感地反映骨骼的变化情况,如血清骨转换标志物BALP、Trap-5b等,有关PTH治疗对骨转换等生化指标的影响报道不一[12]。BALP是组织非特异性碱性磷酸酶的一种特殊形式,由成熟阶段成骨细胞合成并分泌,与细胞外骨基质结合,是最常见的评价骨形成和骨转换的生化指标,可特异敏感性反映骨形成的活跃程度[13]。Trap-5b可反映破骨细胞的活性。本实验中通过检测去卵巢骨质疏松大鼠hPTH1-34治疗期间BALP、Trap-5b水平,分析骨转换指标在疗效监测中的价值,OVX大鼠每周3次皮下注射20 μg/kg的hPTH1-34,治疗3个月的结果显示,OVX安慰剂组大鼠血清BALP、Trap-5b水平明显低于SHAM组,证明由于雌激素水平下降,导致骨转换加快,骨形成也加快,是高转换型骨质疏松。而hPTH1-34组治疗12周后,血清中的BALP、Trap-5b水平均明显高于OVX安慰剂组,提示PTH可以降低大鼠去卵巢增加的骨转化,骨形成速率得到提高。研究还发现BALP作为疗效观察指标在监测hPTH1-34治疗原发性骨质疏松症中可能更为敏感,可以为临床提供更具时效性的数据。在促进骨合成的治疗过程中,BALP均持续升高,表明患者骨形成活跃。有研究证实OVX后大鼠破骨细胞数量持续下降而活性持续升高,破骨细胞数量与血清Trap-5b水平密切相关,在OVX大鼠,血清Trap-5b水平变化并不能真正代表破骨细胞骨吸收活性的变化,而在更大程度上代表破骨细胞数量的变化[14]。本研究结果提示在促进骨合成的治疗中,同时联合血液骨转换标志BALP、Trap-5b等的监测可以弥补单纯观察BMD导致敏感性欠缺的不足,了解用药是否规范,及时调整治疗方案,有助于更准确地判断药物的疗效及依从性,为临床治疗提供实验依据。

骨盐的主要成分是钙和磷,是骨基质的基本原料,当骨盐的流失到一定的程度,体内钙和磷就缺乏,引起血液钙和磷水平的降低。骨中钙维持着骨骼的强度。钙流失过多,骨的显微结构发生改变,则骨强度减弱。钙代谢受多种因素影响,其中之一就是雌激素的水平。雌激素作用于成骨细胞,拮抗了糖皮质激素对成骨细胞生长的抑制,阻滞了钙过多的从骨骼中游离出来[15]。本实验中,大鼠OVX后,钙含量显著降低,提示OVX能影响钙代谢,使骨骼中钙流失过多。hPTH1-34治疗12周后,血钙、磷含量显著增加,明显高于对照组,提示钙、磷代谢得到改善,考虑原因:PTH是血钙、磷的主要调节激素,文献报道PTH可增加1,25(OH)2VitD水平,后者促进肠钙、磷吸收增加和尿磷排泄减少所致[16]。

因有试验结果提示使用hPTH1-34可能会增加小鼠癌症(如骨肉瘤)的倾向,虽然在本实验未发现,但在临床应引起重视,其影响有待进一步观察与探讨[17]。总之,hPTH1-34能增强骨合成代谢,抑制骨吸收,对股骨、腰椎骨量和BMD有增高作用,是治疗绝经后骨质疏松症非常有前景的药物。

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第7篇:松鼠的资料范文

【关键词】:骨质疏松;动物模型;造模

【中图分类号】R-332【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)08-012-2

骨质疏松症是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征,致使骨的脆性增加以至易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病。它是老年人的一种常见病、多发病,其防治已成为世界性的重要卫生问题之一。因此,要研究此病的发病原因、机制,研制各种预防和治疗新药,了解各种治疗手段的作用机理,动物模型作为研究的重要手段,起着不可替代的作用。

1模型动物选用原则

使用实验动物进行实验的目的,是用最少的动物数量达到最大的精确度,最好的可重复性和稳定性。原则要求OP在组织学表现上与人类一致;遗传稳定性;遗传背景明确;资料完整便于交流;动物经济、易饲养、操作简便;符合伦理学标准。

2模型动物

2.1啮齿目动物:①大鼠:大鼠是建立OP模型应用最广泛的动物[1]。常用Wistar、SD大鼠等来做OP模型。大鼠骨代谢与人有许多相似之处[2]:随年龄增长骨量丢失,相似的骨松质分布及重建功能,卵巢切除后高的骨转化率及对性激素相似的反应性等。②小鼠:采用小鼠进行骨代谢遗传因素的研究[3],导入或敲除目的基因,观察其表型特征和病理变化,是目前OP研究领域中最感兴趣的课题之一。

2.2兔形目:兔在OP模型研究中也被广泛应用[4]。由于其性格温顺、便于饲养、成本经济、有明显的哈佛重建能力等优点,常被用于去势兔OP模型。

2.3食肉目:狗在合成代谢和结构特征方面,与人类骨骼十分相似,其皮质骨有丰富的哈佛系统,与松质骨比例适当,因而被用于OP的模型研究。

2.4偶蹄目:①猪:小型猪的培育为猪作为模型动物开辟了广阔的领域。具有层状骨、骨小梁和骨皮质重建与人相似,骨骼大,足以接受人工装置植入,可以多次采活检,多次取血标本等优点。不足之处是:价格昂贵;卵巢子宫切除手术较困难,因为子宫血管很容易破裂[5]。②绵羊:绵羊作为骨质疏松动物模型的报道很少。但因其性格温顺,容易圈养、价格便宜、能反复骨活检、便于安装人工植入体等优点,是一种极具潜力的骨质疏松模型动物。③山羊:国内有应用山羊进行去势建立骨质疏松模型的报道[6]。

2.5灵长类:灵长类的内分泌代谢、生殖周期、骨生物力学特性及骨组织变化与人类极为相似,最适于作OP模型动物,但费用昂贵、实验操作难度高、实验周期长等因素限制了研究应用。

3OP模型的制备

3.1绝经后骨质疏松模型

3.1.1去势造模:Saville于1969年用大鼠首先建立,现在去势雌鼠骨质疏松模型已成为公认的标准化的绝经后骨质疏松症经典模型。方法是选择合适月龄的雌性大鼠,无菌手术切除双侧卵巢,一定时间后处死,处死前后采取血液、尿液、骨或骨髓等标本,进行各项指标的检测[7]。去卵巢成年大鼠模型主要反映妇女绝经后骨量缓慢丢失期的骨丢失与骨代谢特点,3-9月龄为复制成年大鼠OP模型的合适年龄。

3.1.2非手术造模:不摘除动物卵巢,而给予影响动物内分泌的药物,抑制动物生理状态下雌激素的分泌,经过一定时间后,测定动物骨组织各项指标。常用药物有:①busere

-lin(商品名),是一种促黄体素分泌激素的类似物,有降低血清雌二醇(E2)含量的作用;②Casodex,非甾体类雌激素拮抗剂,它可使体内雌二醇耗竭。通过血清雌二醇含量测定、大鼠阴道涂片检查及子宫重量等指标的观察,可见药物法能成功地模拟绝经后状态[8]。

3.2老年男性骨质疏松模型

男性骨质疏松症的研究起步较晚,其发病机理也并不十分清楚,但雄激素减少是男性老年人发生骨质疏松的重要原因之一,基于此,切除(ORX)大鼠OP动物模型成为研究男性骨质疏松的重要工具。但考虑到年龄的影响,老龄雄鼠ORX后造成的骨量减少可能涵盖了增龄和去势的双重作用[9]。

3.3继发性骨质疏松

3.3.1营养缺乏性骨质疏松症

通过给动物饲喂缺乏钙、磷、VitD等的食物,可使骨密度下降,血钙磷浓度上升,尿钙增加,符合骨质疏松的表现。常作为辅助方法,与其他方法结合制作OP模型[10]。

3.3.2药物性骨质疏松症

(1)糖皮质激素致骨质疏松:机理是超生理剂量的皮质类固醇激素抑制成骨细胞活性,使骨形成减少同时可引起机体的钙、磷、维生素D和甲状旁腺素代谢的变化,促进骨吸收,诱发骨质疏松。采用的动物以大鼠为主,药物有醋酸泼尼松、氢化可的松、地塞米松,诱导途径有灌胃、肌肉注射,一般5~6周即可造模成功。

(2)维A酸致骨质疏松。维A酸是维生素A的衍生物,并有与其相似的药理作用,主要用于皮肤科,伴有骨质疏松副作用。邵金莺[11]等于1989年首创维A酸诱发的骨质疏松动物模型,后来的研究者在应用中略有改进,一般用70mg/(kg・d)~105mg/(kg・d)连续灌胃2周,可致大鼠股骨相对体积、平均骨小梁宽度及单位面积骨小梁内骨细胞数显著下降,其组织形态学与雌激素缺乏引起的OP极为相似。

3.3.3废用性骨质疏松症

长期卧床或不活动等,可使正常骨代谢遭到破坏,发生骨质疏松。造模方法有很多种,全身制动如将大鼠限制于小笼内;局部制动如局部石膏固定、脊髓半横断术、坐骨神经切断术、周围神经切断术、肌键切断术、绑腿、套筒法等。废用性骨质疏松动物模型的制备对临床上研究长期卧床及骨折固定等引起的骨质疏松有重要意义。

3.3.4其他:还有转基因模型,基因敲除模型,酗酒[12]、吸烟致骨质疏松模型等。

4结语

随着老龄化社会的到来,骨质疏松症越来越被重视,现有骨质疏松模型的采用将会不断增加,随着研究的深入和新技术的出现,相信新的模型将不断出现,骨质疏松症的治疗方法也将不断得到改进。

参考文献

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[3] 程少丹,王拥军,唐德志,等.OPG基因敲除小鼠骨质疏松情况的研究[J].中国骨质疏松杂志,2008,14(1):16-19.

[4] 宫琳,周延民,李春艳,等.快速建立兔骨质疏松症动物模型的方法[J].吉林大学学报,2008,34(5):903-906.

[5] 贾经汉,邱新建,陈志坚.常用骨质疏松动物模型特点的综述[J].广西中医学院学报,2006,9(4):76-79.

[6] 程立明,丁铭,李子荣,等.羊骨质疏松模型在人类骨科研究中的作用[J].中国骨质疏松杂志,2008,14(6):441-447.

[7] 郭宏,张润荃,刘洪臣,等.去势大鼠骨质疏松模型的综合评定[J].中华老年口腔医学杂志,2009,7(4):196-199.

[8] 汪青,孙兰,龚海洋,等.骨质疏松动物模型建立与评价[J].中国药理学通报,1999,15(5):391-395.

[9] 裴育.切除大鼠骨质疏松动物模型的研究及应用[J].国外医学内分泌学分册,2002,22(4):224-226.

[10] 张月峰,韩景献.骨质疏松动物模型研究进展[J].动物医学进展,2005,26(3):8-11.

第8篇:松鼠的资料范文

阿尔山市林业局紧抓林业六大工程五大转变带来的机遇,生态建设有了长足的发展。但随着有林地面积的不断增加,大面积的落叶松和樟子松幼林也面临着病虫鼠害的侵袭。据监测,阿尔山市林业局境内近几年森林病虫鼠害发生面积占有林地面积的70%左右,平均每年发生病虫鼠害面积近1万hm2。阿尔山市林业局地处农、林、牧交汇处,森林病虫鼠害种类多、发生频率高。落叶松林主要受落叶松毛虫危害、樟子松幼林主要受鼠害的危害,这些害虫和鼠害是我国政府规定的重点防治对象。特别是近年来由于全球气候变暖,使阿尔山林区气温上升降水量偏少,为森林病虫鼠害的暴发提供了适宜的环境条件,导致上述虫害、鼠害大面积发生并不断蔓延,造成珍贵的针叶林受到严重危害,已对森林生态系统造成严重的破坏。针对目前的森林病虫鼠害发展趋势,为了提高对森林病虫鼠害的可持续控制能力,建设健康的森林生态系统,阿尔山市林业局森林病虫鼠害防治工作必须加强,以有效遏制林业有害生物危害高发势头。 1 自然条件 阿尔山市林业局位于内蒙古自治区兴安盟西北部,西与蒙古国接壤,东、北与呼伦贝尔市相邻,南与科尔沁右翼前旗毗邻,地理坐标为东经19°28′~121°23′,北纬46°39′~47°39′。与蒙古国的国境线长93.5km。地处大兴安岭中段,是大兴安岭山脉与蒙古高原的过渡地带,山川交错,丘陵起伏,地势东北高,西南低,海拔500~1400m。属寒温带大陆性季风气候,春季干燥、风大、降水较少,夏季短促炎热、降水较多,秋季凉爽、温差较大,冬季严寒漫长;年平均气温-3.2℃,最低气温-45.7℃,最高气温34.1℃,>10℃有效积温为1346℃,无霜期50~80d,年降水量448mm,年平均日照时数为2580h。阿尔山市林业局原始森林植被以兴安落叶松针叶林为主体。但由于历史上的森林火灾和掠夺式的采伐,原始森林已破坏殆尽,形成了以白桦为优势的阔叶萌生林景观。主要天然乔木树种有兴安落叶松、白桦、黑桦、山杨、杨树和柳树。野生植物资源丰富,其中食用植物有木耳、蕨菜、蘑菇、黄花菜、柳蒿等;药用植物有芍药、金莲花、桔梗、杜鹃等;山果类有山丁子、稠李子、越桔等。阿尔山市林业局土地总面积49812hm2,其中:林业用地面积33466hm2,非林业用地面积16346hm2。林业用地中,有林地面积14603hm2,占43.64%;疏林地面积157hm2,占0.47%;灌木林地面积61hm2,占0.18%;未成林造林地面积1118hm2,占3.34%;宜林地17502hm2,占52.3%;苗圃地25hm2。森林覆盖率29.44%。 2 森林病虫鼠害防治目标 按照“预防为主,科学防控,依法治理,促进健康”的森林病虫害防治方针,坚持可持续控灾战略,以保护森林资源、促进林业可持续发展为宗旨,加强森林病虫鼠害防治基础设施建设,提高阿尔山市林业局对森林病虫害的防灾、御灾和控灾能力,迅速遏制森林病虫害的传播、扩散和严重危害的势头,为促进当地林业的健康发展提供强有力的保障。通过实施对森林病虫鼠害的可持续控制,建设健康的森林生态系统,保护林业建设成果,服务于生态文明建设。防治目标要达到下列要求:监测覆盖率:重点治理区达到90%以上,一般治理区达到85%以上;成灾率:重点治理区控制在6.5‰以下,一般治理区控制在3.0‰以下;无公害防治率:重点治理区达到100%,一般治理区达到100%;测报准确率:重点治理区达到90%以上,一般治理区达到85%以上。 3 森林病虫鼠害防治区划及防治对策 根据近几年对阿尔山市林业局森林病虫鼠害监测资料分析,确定防治任务为25000hm2。主要防治对象为危害兴安落叶松、樟子松针叶林的病虫害和鼠害。依据分类施策的原则,按照森林病虫鼠害发生频率的高低和危害程度,将阿尔山地区划分为重点治理区(森林病虫害常发区)、一般治理区(森林病虫害偶发区)和控制区(安全区)3个类型区。 3.1 重点治理区防治对策 加强监测预报,采取有效措施控制虫口密度、害鼠的数量,保护好害虫害鼠的天敌,严禁捕杀各类益鸟,以生物防治手段为主,辅以物理防治,伐除、清理病腐木,达到重点治理区内病虫鼠害发生频率降低,受害面积缩小,受害程度减轻,使生态环境不断得到改善,其治理目标为:监测覆盖率达到90%以上,成灾率控制在6.5‰以下,无公害防治率达到100%,测报准确率达到90%以上。 3.2 一般治理区防治对策 以森林病虫鼠害灾情监测为主,严密监测病虫鼠源。采取预防为主,重点防控的策略,实施封山育林,加大管护力度,保护利用天敌。其治理目标为:监测覆盖率达到85%以上,成灾率控制在3.0‰以下,无公害防治率达到100%,测报准确率达到85%以上。 3.3 控制区防治对策 以加强林木保护管理和合理经营利用为主,加强监控、积极预防,不给各类害虫和害鼠留有繁衍、生存的空间,防止现有的生态环境受到破坏,保持森林生态系统的稳定发展。 4 防治效益预测 4.1 生态效益 实现对阿尔山市林业局森林病虫鼠害的可持续控制,能更好的保护森林资源和生态环境,有利于保护森林生态系统的健康性、完整性和连续性,使区域内各类森林资源按自然规律演替、发展,发挥最大的生态功能。保护手段更加现代化,也有利于野生动物的栖息与繁殖,在保护生物多样性、维护生态安全和调解小气候等等方面发挥更大的作用。 4.2 社会效益 通过采取一系列森林病虫鼠害防治措施,既可保护阿尔山市自然生态环境,又增加了当地群众和地方政府培育森林的经济收入,对于阿尔山市旅游业的发展、绿色GDP的发展具有很大的促进作用,同时,也能够调动广大群众植树造林、绿化祖国的积极性,具有一举多得的社会效益。#p#分页标题#e# 4.3 经济效益 直接经济效益是森林得到有效的保护,森林资源得到可持续发展。间接的经济效益是在涵养水源、防止水土流失、保持水土、调节气候、净化空气、减少风沙危害、生物多样性的保护与利用等方面具有潜在的经济效益。维持区域农牧业和其它经济的持续发展及维护生态安全等方面均有积极作用。同时,对净化水质,调节水的小循环,防止自然灾害,提高生活质量都起着不可替代的作用。

第9篇:松鼠的资料范文

实验材料用具(可自选)

事先在花盆、砖块下捕捉鼠妇10只装入有少量泥土粒的敞口瓶中(图1),无色透明的大饮料瓶2个,沿底开小孔的塑料杯(直径6cm,可用矿泉水瓶截去上大半部分,待用)1个(图2下)、香烟数支、粒状松软泥土、软塑料管、无色透明粘胶皮用细铁丝1段绕三角形的(图2上)支架等。

实验装置的制备

1.将无色透明的大饮料瓶从高的1/3处剪成两部分,下部作为容器,上部作为盖罩。2.在容器内放入塑料杯并使杯垫靠容器壁一侧(如右侧),再在容器左侧放入适量粒状松软泥土。3.将软塑料管绑扎在三角形支架顶端,然后将它架放在塑料杯口上,软管用粘胶皮固定在容器外吹管(图3)。

操作步骤

1.将鼠妇10只全放入容器的塑料杯中(不放入泥土粒),立即在支架顶端插上香烟、点燃,盖上罩并用粘胶皮封住切口,罩(瓶)口盖上纸板,于是香烟自燃形成烟雾(图4)。当香烟快要熄灭时,适当从吹管吹入空气,让香烟继续燃烧,这样就可形成较浓的烟雾。

2.注意观察:(1)实验初期鼠妇活动的情况;(2)当烟雾很浓时鼠妇的活动情况;(3)浓烟雾形成经过10min(分钟)期间鼠妇活动的情况。

实验记录

将上述实验观察到的情况,认真记录于下表内:

分析结论

分析香烟烟雾对鼠妇是否有影响,并导出结论。

讨论与交流

1.通过该实验的观察,你有什么思考和建议?

2.你想想:利用香烟和其他动物(植物)设计更直观、更有说服力的实验。

相关资料

(1)烟草的化学成分十分复杂,含多种有毒物质。一支中等质量的香烟仅重0.5g,内含尼古丁20mg。烟点燃后所形成的烟雾中含有更多的毒性物质(二甲基亚硝胺、二烷基亚硝胺、亚硝基吡咯烷、甲醛以及CO等)。

(2)烟草的有害物质对人体中枢神经系统、呼吸系统、血液系统、消化系统等均有较大的毒害作用。长期大量吸烟或被动吸进烟雾会导致组织细胞缺氧而产生头晕、头痛,全身乏力、嗜睡,甚至恶心等症状。

(3)据报道:在全球11亿烟民中,我国占了3.3亿。我国每年死于与吸烟有关疾病的约有100万人。其中既有吸烟者又有被动吸烟者。预计20年后,这个数字将增至200万。