梅毒血清学精选(九篇)
第1篇：梅毒血清学范文
【关键词】 梅毒； 梅毒血清试验
Hot topics about serologic tests for syphilis
ZHENG Zhancai
Department of Dermatology, China-Japan Friendship Hospital，Beijing 100029，China
【Abstract】Serologic tests for syphilis include two different assays: non-treponemal antigen test and treponemal antigen test, which are usually performed in combination for one patient. The former is mainly employed to evaluate the efficacy of anti-treponemal treatment, while the latter is to make the diagnosis. This paper has discussed the present hot topics about serologic tests for syphilis, which include biologic false positive and false negative results, positive reports on tests before operation, sero-fast after treatment and its managements.
【Key words】 Syphilis; Serologic tests for syphilis
人体感染梅毒螺旋体约4~10周后，血清中产生两类相关抗体。其一为非梅毒螺旋体抗体，也叫抗心磷脂抗体，主要是IgM，也有少量IgG，产生机理尚不十分清楚，一般认为是由受损伤细胞的线粒体释放出心磷脂，心磷脂作为抗原刺激人体免疫系统产生相应抗体。其二为抗梅毒螺旋体抗体，由梅毒螺旋体抗原本身直接刺激人体免疫系统产生。梅毒血清试验就是检查患者血清中这两种抗体。本文参考近年来的一些文献，结合笔者的临床体会，对梅毒血清试验的几个热点问题进行一些讨论。
1 非梅毒螺旋体抗原血清试验假阳性
检测非梅毒螺旋体目前国内主要用快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma reagin circle card test，RPR）、甲苯胺红不加热血清试验（Toluidine red unheated serum test, TRUST）。该试验敏感性高，可达95%~100%，特异性稍低，个别情况下有假阳性，因此不能用于确证诊断，但治疗后滴度下降并可能转阴，所以可用来判断疗效。
除梅毒以外，偶尔可见其它因素或疾病因素引起的非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性，称为生物学假阳性(biological false positive, BFP)，此时梅毒螺旋体抗原血清试验为阴性。曾经报告能引起BFP的情况主要包括[1,2,3]：（1）某些自身免疫病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、抗磷脂综合征等。在SLE患者，RPR、TRUST 生物学假阳性发生率是很低的，徐世正（1986）报告的发生率为0.7%（1/136），沈大为（1994）报告的发生率为0.47%（1/213 ）。（2）某些非梅毒螺旋体性感染，如HIV感染、病毒性肝炎、某些急性感染性发热性疾病，麻风，活动性肺结核。（3）某些恶性肿瘤。张磊等报告2671例恶性肿瘤患者共检出TRUST假阳性36例，其中男性21例,女性15例。假阳性率1.46%（36/2671）。
至于RPR、TRUST生物学假阳性产生的原因，在SLE等自身免疫性疾病患者体内可产生β2-糖蛋白Ⅰ依赖性抗心磷脂抗体，梅毒产生的抗体为非β2-糖蛋白Ⅰ依赖性抗心磷脂抗体，两种抗心磷脂抗体之间偶可出现交叉反应。恶性肿瘤患者较易出现TRUST假阳性的确切原因尚待进一步研究，可能是某些肿瘤抗原与心磷脂抗原存在相似的表位，或者肿瘤患者体内产生的抗肿瘤抗体能与心磷脂抗原发生交叉反应[2]。
判断RPR生物学假阳性要符合以下标准：(1)非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性，但梅毒螺旋体抗原血清试验阴性。（2）需排除技术性假阳性，即由检测过程中的技术性误差因素造成，如操作失误、环境温度、振荡频率、判断时间过长、判断的准确性等因素以及试剂因素或标本的保存或转送不当等。技术性假阳性有时可以见到，有作者报告[4]接诊院外转诊RPR阳性43例，经复查其中有30例确诊为假阳性。如此高的假阳性率应该是技术性假阳性。（3）一次检查结果不足为凭，间隔一段时间多次复查均为RPR阳性，而TPPA阴性。（4）一般情况下，BFP的滴度都较低，多在1∶8以下。
笔者体会，RPR、TRUST生物学假阳性虽然确实存在，然而其发生率可能不像某些文献报告的那么高。随着检测技术的改进和RPR、TRUST检测试剂盒质量的提高，两种抗心磷脂抗体之间已经基本上不再有交叉反应[5]，生物学假阳性已降到很低，目前在临床上极为少见。我院每日做梅毒血清试验60~80例，近5年来，仅发现1例TRUST假阳性（青年女性1例，TRUST 阳性1∶2，TPPA阴性，原因不明）。如果遇到单纯RPR、TRUST阳性，一定要马上复查，特别是检验科短时间内报告了数例RPR假阳性，首先要排除由技术性原因引起。其次在硬下疳的早期也偶可出现这种情况，但很快两类抗体就会在血中同时出现。
2 梅毒螺旋体抗原血清试验假阳性
检测抗梅毒螺旋体抗体常用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（Treponema pallidum particle agglutination assay，TPPA)和梅毒螺旋体荧光抗体吸附试验(fuorescent Treponema antibody absorption test，FTA-abs），试验敏感性、特异性均可达到95%~100%，是诊断梅毒的金标准，用做确证试验。FTA-abs和TPPA均具有很高的敏感性和特异性，二者具有相同的临床意义，均可作为诊断梅毒的金标准。但这类试验治疗后难于转阴，约70%的患者终生阳性，因此不能用于判断疗效。
既然是诊断梅毒的金标准，那么理论上这类试验不应该有假阳性出现。然而，据一些梅毒学书籍记载，FTA-abs和TPPA生物学假阳性约有0.1%~1%，并列举了一些相关疾病。SLE患者血清可使FTA-abs呈假阳性反应，但此时梅毒螺旋体多呈串珠状荧光，而真阳性为均匀性荧光。传染性单核细胞增多症患者可能由于嗜异性抗体存在，可使TPPA呈假阳性。在某些梅毒螺旋体抗原血清试验假阳性患者中，血清中可同时存在多种自身抗体，如抗核抗体，抗线粒体抗体等。由疏螺旋体引起的Lyme病，也可能会发生梅毒螺旋体抗原血清试验阳性，而非梅毒螺旋体抗原血清试验阴性。需要指出的是，由其它一些密螺旋体感染所致的疾病，包括雅司、品他、地方性梅毒等，梅毒血清试验反应阳性，包括反应素试验和梅毒螺旋体抗原血清试验，目前在我国基本没有这三种疾病。
笔者检索发现近14年有7篇国内文献报告TPPA 或TPHA生物学假阳性，报告的假阳性数量往往较多，假阳性率很高。但这些文献均非出自权威机构和权威杂志，作者多不是皮肤性病科医生，可能对梅毒缺乏临床经验，在梅毒诊断标准和梅毒血清假阳性概念方面还存在模糊认识，特别是对潜伏梅毒缺乏认识，在TPPA阳性、甚至TPPA和RPR同时阳性的情况下，仅仅依据患者否认不安全性接触史和缺乏相关临床症状来排除梅毒的诊断，这是不对的。笔者认为，梅毒特异性抗体假阳性虽有记载，但相当罕见。至少在目前尚没有特异性更强的检测方法的情况下，凡FTA-abs 、TPPA阳性者，均应该诊断梅毒。近年来出现的一些新的检测手段如梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB），能否作为特异性更强的方法？目前这方面的研究资料还不多。
与FTA-abs 、TPPA不同，TP-ELISA法检测抗梅毒螺旋体抗体时假阳性报告较多。国内有很多研究报告，反映TP-ELISA法与TPPA法符合率存在着一定的差异，TP-ELISA假阳性率0.3% (10/3289) 至2.8% (14/507)不等[6,7,8]。王凤玲等[9]对ELISA法检测梅毒产生假阳性的原因作了分析总结，影响因素包括标本因素如标本处理不完全、标本溶血、标本被细菌污染、标本保存不当等，操作失误，仪器的因素如酶标仪使用的影响、全自动加样仪加样时拖带阳性，方法学因素如灰带区现象、空白对照的影响等。
3 梅毒血清检查假阴性
梅毒血清检查假阴性可见于下面的情况：（1）在一期梅毒硬下疳早期，梅毒血清反应可呈阴性，尤其是RPR。（2）极早期的梅毒，得到及时治疗，梅毒血清试验可不出现阳性反应。（3）在二期梅毒，可发生RPR假阴性，称为前带现象，发生率小于1%。原因可能和血清抗心磷脂抗体过多有关，抗原抗体比例不当，阻止了抗原抗体反应发生。当血清被稀释后，可产生阳性结果。（4）晚期梅毒患者血清中抗心磷脂抗体含量很低，有时也可出现RPR假阴性。
4 潜伏梅毒和术前梅毒血清检查阳性
体检时查出梅毒血清阳性，但从未出现过梅毒症状和体征，这种情况称为潜伏梅毒。而有症状梅毒治疗后，症状和体征已经消失，但血清尚未转阴者，不能称为潜伏梅毒。潜伏梅毒发生机理尚不清楚，可能和患者体质特殊性或所感染的螺旋体菌株情况有关。对潜伏梅毒患者要尽量判断病期，以2年为界限分为早期和晚期，治疗方案不同。然而，要准确判断潜伏梅毒的病期往往非常困难，需结合血清滴度高低，不安全性接触史的情况来综合判断。判断不清者应按晚期潜伏梅毒处理。近年来，由于要求患者术前或输血前检查传染病包括梅毒血清试验，查出的潜伏梅毒病例越来越多，文献报告阳性率为1.61%(106/6557)[10]、2.8%（166/5887）[11]。主要为潜伏梅毒，中老年人居多，50岁以上占53%~62.2%[10,11]。超过半数患者否认既往梅毒史，系首次查出梅毒。抗体滴度一般不高，RPR多数在1∶8以下。笔者认为，凡既往未曾进行治疗者，即便RPR滴度很低，也建议进行规范的抗梅治疗。至于先治疗还是先手术，则根据具体情况而定。如为择期手术，则可先进行抗梅治疗。
5 血清固定研究进展
经规范驱梅治疗后临床表现消失，早期梅毒12个月、晚期梅毒24个月，其血清反应素试验仍不转阴者，称为血清固定。对于判定早期梅毒血清固定的具体时间，目前尚无统一标准。有定为6个月的，有定为1年的，也有以2年为限的。对梅毒血清固定判定标准不统一，必然会影响结论。文献报告的血清固定的发生率17.5%~32.1%不等[12,13]。笔者认为，不要把时间作为判定血清固定的唯一条件，还要看治疗后RPR滴度是否还在进行性下降；血清固定的判定不要过早，以早期梅毒12个月、晚期梅毒24个月为宜；然而，如果抗梅治疗后RPR滴度下降不理想，复治最好“赶早不赶晚”，以早期梅毒6个月、晚期梅毒12个月为宜。
血清固定发生的原因目前还不太清楚。可能和患者自身的免疫状态有关，主要是细胞免疫功能受到抑制。也可能和梅毒开始治疗的早晚、药物选择是否得当有关，初始RPR滴度较低、潜伏梅毒及应用大环内酯类药物治疗的梅毒患者较易发生血清固定[13]。患者在规范抗梅治疗之前偶然的抗生素使用，亦会干扰疾病的自然演变过程。在有些患者，也不能排除体内有潜在的活动性病变，如患者中枢神经系统可能残存梅毒螺旋体，存在无症状神经梅毒。
血清固定如何处理：首先要进行全面体检，以明确是否存在神经梅毒、心血管梅毒或其它内脏梅毒。CSF检查很重要。抗梅治疗后在预期时间内血清降低不理想或发生血清固定的，可首先选用苄星青霉素或普鲁卡因青霉素复治。也可试用下列方法，据报告可能有一定效果[14,15,16]：（1）头孢曲松1.0g静脉滴注，每日1次，连用15天。（2）水剂青霉素，每天2 400万u，静脉滴注 (每次400万u，每4h1次)，连续14天，然后给予苄星青霉素，每周240万u，肌内注射，共3次。（3）常规肌注苄星青霉素，合并使用10%碘化钾口服，每次10ml，每日3次，连续1个月。
对于经过多次复治的血清固定，迄今尚无更有效的治疗方法。在经过详细的检查，特别是排除了心血管、神经和内脏梅毒后，应停止治疗，告诉患者不必过于担心，解除顾虑，定期随访，所需随访时间尚无一定标准，个人建议应长一些，最好3~5年以上。
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第2篇：梅毒血清学范文
关键词： 梅毒螺旋体；甲苯胺红不加热血清试验；酶联免疫吸附试验；明胶颗粒凝集试验
梅毒的病原体为苍白密螺旋体，亦称梅毒螺旋体，主要通过性传播，也可以通过血液传播、母婴传播，人体感染后可侵犯皮肤黏膜并侵犯全身的组织和器官而产生多种症状和体征。正确选择检测实验方法，对术前、输血前、孕检及梅毒的诊断和治疗有重要的临床意义。本文对我院患者梅毒的筛查，采用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）三种方法，并对检测结果进行了比较分析，报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 我院2013年6～9月术前、输血前、门诊及社区患者，共1379例。
1.2试剂 TRUST：上海荣盛生物药业有限公司；ELISA：北京万泰生物药业有限公司；TPPA ：日本富士瑞必欧株式会社。
1.3仪器 科华ST-36W洗板机；科华ST-360酶标仪。
1.4方法 严格按试剂盒内说明书方法操作。
2 结果
对1379例标本进行梅毒TRUST和ELISA方法检测，用TPPA法确证。TRUST法检出28份阳性，ELISA法检出52份阳性，其中两种方法均为阳性的25份。经TPPA法进行确证后，3份TRUST阳性中有2份为假阳性，假阳性率7.1%；27份ELISA阳性中有2份为假阳性，假阳性率3.8%。ELISA假阳性标本再用TRUST检测为阴性，标本倍比稀释后重检，未发现带现象所至的假阴性。见表1。
以TPPA法为判断标准，经计算得出TRUST法敏感性51.0%，特异性92.9%，与确证试验TPPA法有显著性差异（P0.05）。见表2。
3 讨论
梅毒螺旋体进入机体后产生非特异性抗类脂质抗体和特异性的密螺旋体抗体，针对不同人群的检测目的选择合适的实验方法尤为重要。
TRUST试验是用VDRL重悬于甲苯胺红颗粒作为抗原检测血清中的抗类脂质抗体，为梅毒非特异性抗体，在梅毒感染的不同时期检出率差别较大[1]，在感染潜伏期由于其抗体出现时间相对较晚，一般阳性率低，治疗后或晚期梅毒TRUST浓度可不同程度下降或呈阴性，不易检出，而对二期梅毒有较高的诊断价值[2，3]。TRUST法检测还易受类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病影响[4]，能引起非螺旋体抗原血清试验生物学假阳性反应。当抗体浓度过量时，会出现前带现象引起假阴性而造成漏诊。作为过筛试验，TRUST具有操作简便快速、成本低、不需依赖仪器判断结果等优点，但其敏感性低，特异性不高，不能自动化，故此法适用于梅毒疗效观察和对复发或再感染的监测。
ELISA是用双抗原夹心法，利用基因重组工程合成抗原，检测血清中的梅毒特异性抗体，其特异性、敏感性在本文统计中分别为96.2%、98.0%，与TPPA非常相近。且ELISA试剂成本相对较低，重复性好，使用两步法可有效防止钩状效应，能使用全自动或半自动酶标仪读数，原始数据易于保存，是批量筛查梅毒的理想方法[5]。由于这类方法检测的是抗梅毒螺旋体IgM、IgG抗体，IgM抗体早于IgG抗体出现，对窗口期的检出灵敏度要高于其他两种方法，IgG持续存在体内，无论治疗与否或者疾病是否活动，IgG抗体仍保持阳性[6]，所以不能用以观察疗效、复发及再感染。
TPPA是将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒子上，致敏粒子能和待检梅毒特异性抗体进行反应发生凝集。其敏感性和特异性高，是目前公认的梅毒血清学确证试验。因其抗原来源困难而试剂成本高，操作相对复杂，实验时间长，检测结果易受主观判断影响及不能自动化等缺点，不适于大批量标本的检测[7]。与ELISA法一样，该法是检测梅毒特异性抗体，对梅毒的治疗效果无法判断，主要用于初筛阳性标本的确证。
在我们的实验活动中，根据不同人群的筛查目的，选择合适的梅毒检测方法，如联合检测非特异抗体的TRUST和特异性抗体的ELISA两种检测方法，可以提高梅毒的检出率和准确性，为临床诊断和治疗提供有价值的检测结果，避免漏诊和误诊。
参考文献：
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第3篇：梅毒血清学范文
关键词 梅毒 检测 TRUST TPPA
Abstract Objective：To compare the efficient of the three serum test methods for syphilis.Methods：Use TPPA as a standard test method，compare with TRUST and The SD BIOLINE Syphilis 3.0 test.Results：The sensitivity of TRUST is lower to the TPPA，and The SD BIOLINE Syphilis 3.0 test is no different with TPPA，and also rapidly and accurately.Conclusion：The SD BIOLINE Syphilis 3.0 test is one of the rapidly and accurately clinic test method for syphilis.It can be use in more clinics and hospital for syphilis screening and examine.
Keywords Syphilis；test method；TRUST；TPPA
梅毒是由苍白螺旋体(TP)感染引起的性传播疾病，也是血液传播性疾病之一，可通过母婴传播传给下一代。梅毒自欧洲传入中国已有500年的历史，近年来我国有明显上升的趋势。因此，对梅毒的早期诊断及正确评价治疗疗效，为梅毒的筛选、为防治提供准确、及时的依据显得尤为重要。本文采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、明胶颗粒凝集法(TPPA)、梅毒快速检测试验(The SD BIOLINE Syphilis 3.0 test)三种方法进行比较。
材料与方法
标本来源：均来自我院2006年7~11月皮肤科及妇科门诊就诊的病人，总人数共计106例。其中皮肤科95例，占89.6%；妇科11例，占10.4%。
试剂：TRUST试剂盒由上海荣盛有限公司提供，TPPA试剂盒由日本富士公司提供，梅毒快速检测试验试剂盒由韩国STANDARD DIAGNOSTICS 公司提供。
操作方法：严格按照各厂家提供的说明书进行，且有质控品同时进行试验。
统计学处理：计数资料比较用X2检验。
结 果
见表1。
在全部检测患者中，共检出TPPA阳性62例，阴性44例；梅毒快速检测法检出阳性61例，阴性45例；TRUST检出阳性53例，阴性53例。快速检测法与TPPA的符合率为98.3%，其中有1例结果不相符，该病例为刚出生的婴儿，其母亲为梅毒患者；TRUST与TPPA的符合率为80.6%，且3例TRUST假阳性标本TPPA及快速法均为阴性。
对以上三种方法的检测结果进行统计学处理，TPPA与TRUST两种检测方法的结果有显著性差异(P0.05)。
结论：我们认为梅毒快速检测法在梅毒的检测上具有快速准确的特点，是临床上进行梅毒检测的方法之一，可用于各医疗卫生单位对梅毒的筛查与诊断。
讨 论
机体感染梅毒螺旋体后可产生特异性抗螺旋体抗体(TP-Ab)和非特异性抗类脂质抗体，非特异性抗体出现晚于特异性抗体，使晚期梅毒非特异性抗体可能转阴，都会影响TRUST试验的敏感性。TRUST为非特异性血清试验，敏感性与特异性都有一定的局限性，在一期和晚期梅毒的阳性率只有53%～85%[1]，在早期梅毒和晚期梅毒以及治疗后患者可呈阴性反应，主要用于临床抗梅疗效观察和判愈[2]，且受多种因素如类风湿因子、红斑狼疮的高球蛋白血症等干扰，检测结果中很难避免假阳性和假阴性出现，有时会出现前带现象[3]。
TPPA是检测血清中的梅毒特异性抗体，特异性好、灵敏度高，但试剂昂贵，且操作过程较繁琐，时间长。
梅毒快速检测法与TPPA一样，是检测血清中的梅毒特异性抗体，由实验结果可显示，该方法与TPPA的结果很相近，符合率高，且避免了TPPA法的繁琐的操作过程，避免了TRUST法中所出现的假阳性及假阴性的现象，结果判读简单、快速，可直接用于孕产妇梅毒的检测及可疑献血者的检测等，在临床上值得推广及应用。
参考文献
1 俞树荣.微生物学与微生物学检验.北京：人民卫生出版社，1999：322.
第4篇：梅毒血清学范文
【关键词】梅毒；血清学；转归；血清固定；影响因素
【中图分类号】R759.1【文献标志码】A
梅毒是一种由梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）引起的主要通过或胎盘母婴垂体传播的慢性疾病[1]。TP侵犯会引起患者全身各处脏器发生器官病变、组织破坏、功能丧失甚至死亡。也可引起孕妇死胎、流产或早产等。严重影响患者的生活质量[2]。近年来，我国梅毒发病率显著升高，梅毒已经成为十分严重的公共卫生问题[3]。因梅毒唯一的传播源是梅毒患者，所以控制梅毒蔓延的重要环节就是对梅毒的早发现、早诊断和早治疗[4]。本文对影响梅毒患者治疗后血清学转归的因素进行探讨，现报告如下。
1资料与方法
11一般资料
选取2010年1月至2013年1月期间我院接收治疗的梅毒患者128例，男72例，女56例。年龄17～60岁，平均年龄3725岁；其中早期潜伏梅毒24例（188%），晚期潜伏梅毒18例（141%），一期梅毒31例（242%），二期梅毒55例（429%）。
选择标准：（1）经《中华人民共和国卫生行业标准WS273―2007》梅毒诊断标准确[5]诊为梅毒患者；（2）未经过正规驱梅治疗；（3）自愿参加本项研究。
排除标准：（1）不符合上述选择标准者；（2）有严重的心、肝、肾等疾病；（3）有恶性肿瘤者；（4）有严重精神疾病者。
12方法
121血液采集4℃下，以4000r/min 离心2mL肘静脉全血15min，分离血清。采用RPR（上海荣盛生物制品有限公司）对非梅毒螺旋体抗原血清学进行试验，采用梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）（日本富士有限公司）对梅毒螺旋体特异性抗原血清学进行试验[2]，待测血清以1∶80稀释时出现阳性反应将TPPA判为阳性。
122治疗梅毒16例青霉素过敏者，其中早期潜伏梅毒患者使用多西环素100mg或米诺环素100mg进行治疗，连服14d，2次/d。或使用盐酸四环素500mg，连服14d，4次/d。晚期潜伏梅毒患者口服药物治疗30d。其余108例患者使用苄星青霉素治疗。分别在患者两侧臀部肌内注射240万U苄星青霉素，每周1次，连续注射2～3周。
123治疗后转归驱梅治疗后每3个月到进行医院1次定期复查TPPA和RPR[6]。体征和临床症状消失且不复发，随访期间RPR滴度转阴为血清转阴。临床症状消失且治疗后6个月内RPR下降4倍，治疗后12个月内维持在低滴度（≤1∶8）为血清固定。
13观察指标
分析患者的年龄、性别、病期、治疗药物和RPR初始滴度等。
14统计学方法
采用SPSS 170统计软件，计量数据用平均值±标准差（±s）表示，两组独立样本间用χ2检验。有统计学意义的相关因素行多因素Logistic回归分析。P
2结果
21年龄与性别产生的影响
多因素Logistic回归分析结果显示，驱梅治疗后25例（446%）女性患者发生血清固定，14例（199%）男性患者发生血清固定。患者年龄≤25岁，血清转阴的发生率较大。患者年龄>25岁，不具有统计学意义（P>005）。见表1。
22梅毒病期、治疗药物和RPR初始滴度产生的影响
多因素Logistic回归分析结果显示，不同病毒分期与是否使用卞星青霉素治疗的比较，差异具有统计学意义（P
3讨论
临床上梅毒分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒等多种临床表现。其长期的潜伏状态会累及多种器官和组织，严重影响患者的正常生活，从而引起不必要的精神负担和物质负担[7]。会通过或者母婴传播造成儿童先天性梅毒[8]，早期先天性梅毒会造成早产、生长发育迟缓、肝脾肿大和黏膜损伤等。晚期先天性梅毒[9]会造成视神经萎缩、骨膜损伤、间质性角膜炎、麻痹性痴呆、牙齿畸形等，对人的生命健康造成严重的危害[10]。因此，对梅毒患者早发现、早治疗具有重要的临床意义。
本文研究结果显示，患者的性别、年龄、病期、治疗药物和RPR基线滴度等因素会对梅毒患者驱梅治疗后血清学转归造成影响。本研究中446的女性和199%的男性患者驱梅治疗后发生血清固定。根据多因素Logistic回归分析，性别会对梅毒患者治疗后血清学转归产生影响，且女性患者血清固定的发生率显著高于男性患者，差异具有统计学意义（P
综上所述，患者的性别、年龄、病期、治疗药物和RPR基线滴度等因素会对梅毒患者驱梅治疗后血清学转归造成影响。临床上初始RPR滴度低、女性患者、潜伏梅毒和非青霉素治疗患者易发生血清固定。建议对梅毒患者早发现、早治疗，为降低血清固定的发生率首选使用青霉素驱梅治疗[15]。
参考文献
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第5篇：梅毒血清学范文
关键词 梅毒螺旋体 TPPA ELISA TRUST
梅毒（TP）是由苍白螺旋体引起的性传播疾病，其传染性强，危害性大，感染后可引起全身各组织器官的损害。梅毒主要是通过性接触传播，也可经输血感染或胎儿垂直传播，近年来我国梅毒感染率呈大幅上升趋势【sup】［1］【/sup】，严重危害患者的健康和生命安全。2008年卫生部公布27种法定报告的甲、乙类传染病中，梅毒发病由原来的第7位上升至第5位。目前，血清学检测是实验室诊断梅毒的重要依据之一，所以选择好的检测方法有利于梅毒早期的诊断和及时治疗。我科将TPPA、ELISA、TRUST 3种检测方法结果进行了比较，现报告如下。
资料与方法
一般资料：本组资料选择2009年5月～2011年3月我院门诊及住院确诊的梅毒患者98例，男46例，女52例；梅毒潜伏期或既往感染者36例，现症者62例。另选择90例非梅毒患者，均为我院住院病人，其中自身免疫性疾病患者40例，妊娠孕妇25例，健康对照25例。
试剂与主要仪器：TRUST试剂由上海荣盛生物技术公司提供，TPPA试剂由日本富士株式会社提供，ELISA试剂由厦门新创科技公司提供，上述试剂均在有效期内使用。主要仪器为酶标仪、洗板机、离心机、微量振荡器、加样器和恒温水浴箱等。
方法：3种试验严格按试剂盒说明书操作步骤进行检测，并在试剂盒有效期内使用。
统计学方法：数据采用SPSS13.0软件包进行统计分析，计数资料采用X【sup】2【/sup】检验，3种试验多因素检测比较采用t检验。
结 果
3种方法检测98例梅毒患者血清抗体结果：TPPA有96例阳性，敏感性为97.96%；ELISA有97例阳性，敏感性为98.98%；TRUST有80例阳性，敏感性为81.63%。而TPPA的假阴性为2.04%，ELISA假阴性为1.02%，TRUST假阴性为18.37%。
3种方法检测90例非梅毒患者血清结果：在90例非梅毒患者中，TPPA阳性有3例，阴性有87例，其特异性为96.67%；ELISA阳性有8例，阴性有82例，特异性为91.11%；TRUST阳性有18例，阴性有72例，特异性为80%。见表1。
讨 论
感染梅毒螺旋后机体产生的抗体：人体感染梅毒螺旋后机体产生两类抗体，一类为抗密螺旋体的特异性抗体，感染2～4周后即可检出；另一类为非特异性类脂质反应素抗体，即抗心磷脂抗体，又称反应素多为IgA和IgM混合型抗体。检出的时间要比特异性抗体的时间约迟2周（感染后约6周）【sup】［2］【/sup】。梅毒特异性抗体出现早、消失迟，即便经过治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终身检出，这是诊断梅毒螺旋体感染的依据。非特异性抗类脂质抗体出现较晚，经过治疗可逐渐减少至转为阴性，可用于疗效观察。
TPPA检测：TPPA是将纯化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工载体明胶粒子上，检测血清中相应的抗体，其特异性好、灵敏度高、抗干扰性强。本结果显示，TPPA敏感性为97.96%，特异性96.67%，与文献报道一致【sup】［3］【/sup】。TPPA法已是目前公认的梅毒血清确证试验，但试剂较贵，试剂溶解后需在几天内用完，否则造成浪费。TPPA测定需多步稀释，操作较繁琐、检测时间较长，且以肉眼判断结果，常有主观色彩，原始数据无法保存，不适于大批量的筛选试验，因此TPPA适用于对ELISA或TRUST检测后的阳性标本进行确证试验。
ELISA检测：ELISA法采用双抗原夹心法检测TP特异性抗体，利用酶放大效应，提高检测的灵敏度，对梅毒各期的检出率都较高，而且ELISA试剂成本较低，操作方便，可使用全自动酶标仪，原始数据易于保存。本组实验表明，ELISA有很高的敏感性和特异性，分别为98.98%和91.11%，与TPPA相接近。ELISA的假阴性率很低，本组假阴性率仅为1.02%，与文献报道基本一致【sup】［4］【/sup】。但抗干扰性仍不如TPPA，结果会出现一定假阳性，由于其检测是梅毒的IgM和IgG混合抗体，梅毒IgG抗体在治愈后相当长的时间内仍存在较高的阳性率，甚至终身携带，因此ELISA阳性者只能说明正在感染或曾经感染过，不能判定梅毒活动与否及作为疗效观察，故ELISA适合于手术前检查和输血等大批量样本的筛查试验。
TRUST检测：TRUST是以类脂质为抗原，检测血清中的抗类脂质抗体，为梅毒非特异性抗体。TRUST在一期梅毒早期和晚期梅毒、晚期潜伏梅毒及治疗后梅毒可呈阴性。本组结果显示，TRUST敏感性为81.63%，特异性为80%，远低于ELISA和TPPA。而且该法易受其他因素干扰，在自身免疫性疾病、妊娠及健康人群中均有假阳性，其本组发生就有18例。因此可认为TRUST不适合梅毒的诊断，但该方法操作简便、试剂价格便宜、反应快，不需要特殊仪器设备，方便测定梅毒抗体滴度，其滴度变化与梅毒治疗情况呈正相关。随着梅毒治愈、非特异性抗体消失，该TRUST法转阴，适用于疗效观察随访和复发的辅助诊断。
综上所述，TRUST与ELISA、TPPA是不同的3种检测方法，其TRUST特异性和敏感性与ELISA和TPPA无可比性，但TRUST可判断梅毒患者的治疗情况。而ELISA和TPPA不适合对梅毒治疗情况的判断，因此，3种梅毒检测方法较合理的检测顺序：先用ELISA法筛查，如果出现阳性，则做TPPA确证，如为阳性结果，则再做TRUST试验，若结果为阳性则稀释做定量试验，用以判断病情及观察疗效。
参考文献
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第6篇：梅毒血清学范文
【摘要】 目的 揭示多种疾病梅毒血清学生物学假阳性的疾病谱。 用TRUST及TPPA做梅毒血清学检测。结果 4913例TRUST试验，57例发生生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，系统性红斑狼疮（SLE）17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。结论 所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验，滴度均≤1∶8，其中91.23%的TRUST定量为1∶2，而未经的二期显发梅毒TRUST定量一般≥1∶16。有利于临床的鉴别诊断。
【关键词】 TRUST；梅毒血清；生物学假阳性；疾病谱
【Abstract】 Objective To disclose the meaning of the biological false positive syphilis serology. Methods Detect the syphilis serology with TRUST and TPPA. Results Among 4913 TRUST tests，57 occur the biological false positive reactions，the most occur the lepra，about 31.82% of the lepra patients，secondly RA 17.78%；systemic LE 17.02%，hepatitis 5.43%，scleroderma 3.33%，dermatomyositis 3.13%，activity tuberculosis 1.82%. Conclusion base of all kinds of TRUST quantitive tests of biological false positive reactions is ≤1∶8 and 86.8% TRUST quantivity is 1∶2；however，the TRUST quantivity of untreated Ⅱ developed syphilis is ≥ 1∶16. All of these are useful for the differential diagnosis.
【Key words】 TRUST；syphilis；BFP；disease spectrum
多年的临床试验工作经验，我们发现了一些病人的梅毒血清学生物学假阳性结果有一定的疾病谱，而且其定量检验滴度变化有一定的性，可以帮助临床的正确诊断。因此，我科自1986～2005年对门诊及体检各种疾病患者所做梅毒血清学检验结果进行，现将研究结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 检验病例4913例，包括结缔组织病201例，其中系统性红斑狼疮（SLE）94例，类风湿关节炎45例，皮肌炎及系统性硬皮病62例；变应性血管炎15例；瘤型麻风22例（由望都麻风病院提供血清）；病毒性疾病412例，其中乙型肝炎350例，带状疱疹52例，病毒性心肌炎10例；活动性肺结核55例；寻常型银屑病212例；玫瑰糠疹170例；高脂血症（胆固醇＞6mmol/L）220例；性传播疾病2100例；艾滋病及感染者8例；静脉吸毒者6例；正常孕妇292例；正常人查体1200例。共计八组疾病、一组孕妇和一组正常人。并做61例二期显发梅毒患者（未经治疗）梅毒血清学检验，作为对照组。
1.2 材料 试剂TRUST均采用兰州生物制品公司或武汉生物制品公司生产的试剂，TPPA采用进口日本富士公司生产的试剂。
1.3 试验方法 初筛试验TRUST定性试验阳性者均做定量试验，同时做TPPA证实试验，严格按照试剂盒内试验操作程序进行操作，严格控制试验条件。
2 结果
第7篇：梅毒血清学范文
【关键词】二期梅毒；血清学检查；核酸扩增免疫检测
文章编号：1009-5519（2008）01-0045-02 中图分类号：R446 文献标识码：A
血清学实验仍然是目前梅毒诊断主要方法。对于伴有典型皮损的二期梅毒患者，极大部分都可确诊，由于RPR技术的应用迅速发展和快速特异性高，我们应用核酸扩增荧光免疫检测二期梅毒患者血清梅毒螺旋体梅毒血清学检查比较其诊断意义。
1 材料与方法
1.1 临床标本：收集我院皮肤科门诊2002年2月～2004年10月间具有典型二期梅毒皮损的患者，其中男21例，女13例。年龄21～46岁。夫妻同时感染的8例，有一期梅毒史5例。皮损表现为玫瑰糠疹样皮损14例，掌跖脱屑性红斑11例，银屑病样皮损3例，肛周扁平湿疣3例，大小扁平湿疣2例，梅毒性脱发1例。取34例患者空腹血清同时分别做RPR、TPHA和PCR检测。
1.2 方法：抽取34例患者的空腹血清同时分别进行RPR，TPHA和PCR；PCR试剂，由中山大学达安基因股份有限公司生产，梅毒血清学检查试剂由上海草盛生物技术有限公司生产。按照试剂盒使用说明书操作。
2 结果（见表1）
3 讨论
PCR方法具有特异性很强，敏感性很高并具有快速等特点，因此应用较广泛。特别是对于支原体和衣原体和病毒的诊断有较大临床意义。对于梅毒螺旋体的诊断，由于传统的梅毒血清学检查和梅毒螺旋体暗视野显微镜诊断具有极好的临床诊断意义，在PCR应用方面较少，应用复合RPR方法检测生殖器溃疡中梅毒51例，检查结果分别与暗视野显微镜及梅毒血清学试验结果比较，均有较好的一致性，kappa值分别为0.5%和0.73%。刘爱英[11等应用聚合酶链PCR反应检查结果与暗视野显微镜检查结果比较，差异有显著性P＜0.01，与梅毒血清检查结果比较差异无显著性（P＞0.05）；应用巢式PCR扩增131份拟为梅毒血清标本、血清学方法与巢式DOLA、RPR差异具有无显著性。徐瑾、张顺[2]报道梅毒螺旋体荧光定量PCR检测方法检测梅毒非特异性抗体，阳性率为45.1l%，TPHA方法检测梅毒特异性抗体，阳性率为52.9%，两者阳性率都较低[3]。史俊岩、刘兵报道免疫PCR法检测梅毒螺旋体特异性抗体120份。其敏感性是相同条件下ELISA法的104倍。另外，免疫PCR法检测120份梅毒患者血清特异性抗体阳性率为81.7%，而LISA法阳性率为59.2%。经χ2检验，二者的阳性检出率有显著差异，结果说明免疫PCR法阳性检出率高于ELISA法[4]。彭石潜、周华报道2例胎盘组织荧光PCR诊断早期先天梅毒先人梅毒在研究中采用了荧光定量PCR技术来检出胎盘组织中的梅毒螺旋体的DNA，以探讨荧光定量PCR技术在先天梅毒诊断中的价值。结果与常规血清临床综合综合诊断方法进行比较。通过统计分析显示在诊断先天梅毒新生儿时。荧光定量PCR至少有不低于综合常规诊断方法的价值。而优于临床症状。这对于提高病人梅毒的检出率，减少漏诊的发生有积极的意义。本院34例具有典型梅毒皮损患者，本组34例空腹血清应用核酶扩增荧光免疫检测，结果PCR与血清学RPR比较有差异有显著性P＜0.01，与TPHA差异有显著性P＜0.01。分析原因：实验室条件是合格的，试剂亦是合格试剂，与其他作者差别巨大，二期梅毒患者血清螺旋体没有或极少有关，还是二期梅毒患者体外血清对梅毒螺旋体有无活作用（标本保存时），因此本科特别做好8例有典型梅毒硬下疳和同侧淋巴结肿大的二期梅毒患者，分别取硬下疳分泌物做RPR和TPHA检查，结果8例PCR阳性，8例RPR阳性，8例TPHA阳性，说明试剂和操作方法和完全都无大问题。以上原因望同行进一步分析。
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第8篇：梅毒血清学范文
【关键词】ELISA TPPA 梅毒抗体
苍白密螺旋体引起的性传播疾病，不但引起人类全身性疾病危害人们的健康，同时还传播给下一代。近年来发病率有上升趋势。因此梅毒的早期诊断和及时治疗已成为当前重要问题。机体感染梅毒螺旋体后可产生非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体，实验室检测梅毒抗体阳性是诊断梅毒的重要依据之一。目前用于梅毒血清学检验方法较多，主要包括非梅毒螺旋体抗体血清试验和梅毒螺旋体抗体血清试验。不同的检测方法都有其特殊的临床诊断价值，实验室如何更合理地选用检测方法，避免漏诊、漏诊而产生的医患纠纷等问题是非常重要的。为此，我们就如何更合理地利用梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPPA）两种最常用的不同检测方法对梅毒辅助诊断符合率进行比较分析。
1 资料与方法
1.1标本来源 1000份血清标本来自献血者和临床患者，男618例、女382例，其中包括110份梅毒患者血清、890份健康献血者血清。
1.2 试剂 ELISA检测试剂为上海科华公司产品，TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式社提供，所用试剂均在有效期内。
1.3 方法 所有标本均采用ELISA和TPPA进行血清梅毒螺旋体抗体平行检测，具体操作和结果判定均按试剂盒说明书进行。
1.4 统计学方法 使用SPSS12.0软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两法对110份梅毒患者血清的检测结果比较 TP-ELISA共检出梅毒螺旋体抗体阳性109份、TPPA共检出阳性108份，两法的阳性检出率分别为99.1%和98.2%。
2.2 两法对890份健康献血者血清的检测结果比较 TP-ELISA共检出阳性结果2份，TPPA未检出阳性结果，后经临床及实验确认，2例为假阳性，TPPA-ELISA的假阳性率为0.22%。
3 讨论
3.1 梅毒是由梅毒苍白螺旋体引起，主要通过性行为在人群中相互传播，并可以通过胎盘传染给胎儿，危及下一代，极少数患者通过其他途径传染，如接吻、哺乳、接触梅毒患者的日常用品而感染。机体感染梅毒螺旋体后可产生非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体［1］。依据感染梅毒螺旋体后机体产生抗体的不同，一期梅毒抗体主要是IgM型；二期梅毒抗体主要有IgM、IgG型；三期梅毒抗体主要是IgG型。 转贴于
3.2 RPR试验检查的是人体内的反应素，目前对反应素的来源尚有争议。多数学者认为［2］人体感染梅毒螺旋体后组织受到破坏裂解出来一种类脂成分，这种成分与梅毒螺旋体的蛋白质结合，成为抗原，刺激机体产生抗类脂质抗体即反应素。梅毒螺旋体破坏组织可使机体产生反应素，而其他破坏机体的过程也可产生反应素，所以梅毒患者RPR试验阳性者并不一定感染梅毒螺旋体，如生理状态妊娠、病毒性肝炎、上呼吸道感染、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性肾炎等RPR可以呈假阳性。因此，不能单独根据RPR阳性诊断梅毒，其结果应加以综合分析。
3.3 TP-ELISA是利用基因重组工程合成梅毒特异性抗原包被在微孔滴定板上，检测血清中的梅毒特异性抗体是诊断梅毒螺旋体感染的依据之一。但其检测的是梅毒IgM和IgG的混合抗体，梅毒IgG抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终生阳性。因此，TP-ELISA阳性只能说明正处于感染期或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，所以不能作为疗效监测手段［3］。
3.4 TPPA主要是确认试验，但是它不能判定治疗效果，因为一旦患有梅毒，即便经过正规抗梅毒治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终生检出阳性［4］。
3.5 血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但并非唯一依据，临床应该同时检测非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体进行确诊。近年来梅毒发病率呈直线上升趋势，梅毒的症状和体征复杂多变，临床表现多种多样，医生应在掌握患者的个人生活史及体查的基础上，综合分析梅毒化验结果，排除假阳性、假阴性情况，才能作出正确诊断。
4 结论
ELISA和TPPA都具有较高的敏感性和特异性，两法的检测结果差异无统计学意义（P>0.05）。因TPPA用肉眼判断结果，使结果可靠性下降，并且试剂昂贵，操作复杂，检测时需将样本系列稀释，不利于大批量样本筛查，也不便使用于疗效判断。ELISA法可用酶标仪判断结果，结果较为客观，原始数据易于保存，且与TPPA的相关性好。总之，ELISA试剂成本低，操作方便，是大批量样本筛查的理想方法，适用于目前临床、血站等机构诊断和筛查血清梅毒特异性抗体。
参 考 文 献
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第9篇：梅毒血清学范文
梅毒是由梅毒螺旋体（苍白螺旋体）感染引起的一种慢性全身性传染性传播疾病，对健康的危害程度仅次于艾滋病，几乎可以引起全身所有组织器官的损害和病变，导致功能障碍。近年来，梅毒在我国的再次流行，发病率呈逐年上升的趋势。梅毒早期主要侵犯皮肤黏膜，晚期可累及心血管及中枢神经系统等重要器官［1］，给身体造成严重的损害，既严重危害了社会健康，又影响了家庭的安定。因此，对梅毒进行早期诊断、早治疗，对控制其蔓延至关重要。敏感性、特异性高的梅毒检测方法对梅毒的诊断最有效。根据梅毒的生物学及免疫学特性，目前国内外所用的梅毒螺旋体的检测方法亦很多，现将主要的检测方法作一综述。
非特异性梅毒血清学试验的阳性检出率
非特异性梅毒血清学检查方法有快速血浆反应素环状卡片实验(RPR)和甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）两种。RPR是20世纪80年代问世的非特异性梅毒血清学试验，也是目前国内各实验室广泛应用的主要筛查试验。RPR法检测血清中非特异性抗体，所用抗原为标准的牛心肌脂抗原，主要用于早期梅毒的诊断，王剑等［2］报道RPR用于早期梅毒检测阳性率为75%～85%。该方法有操作简便、迅速、结果容易判定、不需灭活、不需显微镜、抗原不需新鲜配制等优点，适用于大量标本检测，目前许多血站用此试验对献血者进行梅毒普查。但凡属于密螺旋体属的螺旋体均具有与梅毒螺旋体完全一样的类脂质抗原，其主要成份是心拟脂，可激发机体产生抗体，并与牛心磷脂发生反应，因此易出现生物学假阳性反应，且当抗体含量过高时易出现假阴性反应，即前带现象(prozonephenomnon)［3］。路麒等［4］通过实验发现温度较低（低于9℃）时，RPR的假阴性率达10.1%时会有漏检。而TRUST试验所用的抗原是从牛心提取的心磷脂和从鸡蛋黄提取的卵磷脂及胆固醇，与RPR方法比较，TRUST试验是在VDRC试剂中加了甲苯胺红溶液，阳性呈红色有不同程度的凝块悬于液体中，在白色纸卡上结果清晰易读，简便快速，稳定性好，对非特异性反应素抗体导致的阳性标本，TRUST法的检出率和重复性都强于RPR法，EbelA等［5］通过实验比较认为TRUST法比RPR效价测定高一个滴度，根据滴度的变化有助于判断梅毒的治疗效果、复发或再感染，这是其他方法不可替代的。缺点是许多因素影响结果，如高脂血症和抗心磷脂抗体阳性的血清均可干扰而出现假阳性结果［6］。黄波等［7］报道此法对早期梅毒检测出现较高的假阴性（10%）。王治萍等［8］通过改进实验方法发现，应用全自动微孔板法改进TRUST，实现机械操作，减少了人为因素及标本差错，可使其敏感度和特异性提高3%以上。
重组基因与免疫反应的临床应用
采用纯化重组基因的梅毒抗原，以胶体金作为指示标记，于硝酸纤维素膜上进行反应（胶体金法），以双抗原夹心法原理，快速定性检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体特异性抗体，具有快速、简便、灵敏度高、特异性强及无需仪器设备之特点。王华等［9］报道此方法对早期梅毒的检出率可达97.22%，其特异性和灵敏度与TPPA相近，对缩短TP的“窗口期”更有临床意义，比TRUST能更早发现梅毒，抗体滴度低时更易观察结果，可最大限度地避免实验过程中标本处理、温度、湿度、pH值等因素对结果的影响。由于胶体金法试剂成本低，符号显示结果明确，操作简便，可分批或单人份检测，结果易保存。因此，采用灵敏特异的梅毒螺旋体抗体胶体金法可以完全替代TRUST，作为大批量标本梅毒筛查的理想方法，又可以作为诊断试验。但梁大立等［10］在实验过程中发现血清或血浆中特异性梅毒螺旋体抗体浓度过低时，梅毒螺旋体抗体胶体金法会产生假阴性反应（1.57%），这就需要与TPPA方法结合进行综合判断。梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TPELISA)是一种通过基因工程，经利用梅毒螺旋体多肽抗原(KD47、KD42、KD15)包被于反应板的试验，用双抗原夹心法测定梅毒特异性抗体，为近年来应用TP基因工程研制成功而建立的方法。Castro等［11］报道其灵敏度、特异度较高。TPELISA方法主要检测梅毒螺旋体IgG和IgM抗体， 俞伟国等［12］和程艳杰等［13］报道此类方法对早期梅毒的诊断，其敏感度在80%～99.5%，特异性在90.2%～100%。此法检测操作简便，取样量少，不受样本中纤维蛋白和溶血等影响，一次可进行多份样本的检测，具有敏感性高，特异性好，能自动化，判断结果客观准确，成本低，操作简便，适用于大量样本，试剂盒价格便宜，设备简单，试剂稳定，受干扰因素少，结果打印存档，便于实验室标准化和实验室管理等优点，是一种集筛查和确诊为一体的检测梅毒的好方法，值得临床大力推广。ELISA法对梅毒患者的检出率与患者血清中梅毒螺旋体特异性抗体的含量有关，当患者血清梅毒螺旋体特异性抗体含量低于试剂检测限时，就有可能出现假阴性，且TPELISA检测的是梅毒螺旋体总抗体，在梅毒患者治愈后相当长时间仍为阳性， 因此Manavi等［14］认为不利于临床判定是近期感染还是曾经感染和疾病状态。免疫PCR法检测梅毒螺旋体是目前最敏感的一种微量分子检测方法，应用于检测梅毒螺旋体特异性抗体，可直接检查病原体的基因。史俊岩等［15］对120份梅毒血清同时进行免疫PCR和ELISA法检测，结果免疫PCR法阳性检出率为81.7%，而ELISA法仅为59.2%，认为在相同条件下免疫PCR法敏感度优于ELISA法。俞伟国等［12］通过实验比较也认为免疫PCR法诊断一期梅毒的灵敏度高于ELISA及RPR法，其灵敏度、特异性均较高，且结果报告迅速，具有临床推广价值，这对于梅毒患者的早期诊断和及时治疗及发病机制研究具有重要意义，尤其是对可疑梅毒患者和梅毒螺旋体特异性抗体阴性输血人员的复检具有重要的应用价值。但必须严格操作，防止假阳性的产生。
直接观察梅毒病原体的检测方法
直接观察分泌物中的梅毒螺旋体，如见到运动活泼的苍白螺旋体可直接诊断梅毒。是最特异、最准确的诊断方法，但灵敏度低。暗视野检查法是梅毒病原体检测的主要方法，其原理是取皮肤及黏膜破溃的组织液，用暗视野显微镜直接观察到病灶分泌物中的梅毒螺旋体，适用于有硬下疳、扁平湿疹等典型皮肤黏膜损害的早期梅毒患者，在早期梅毒中较RPR、TPPA敏感，通过结合临床症状可直接诊断早期梅毒，被视为诊断的金标准。但傅宗芬等［16］认为，由于受病程、某些外加因素以及检测人员技术水平的影响，敏感性较低（为76.5%）。暗视野检查法(DF)适用于早期梅毒的诊断，该方法不仅操作简单，且经济、快速，但此法很难从干疹或血液中检测梅毒螺旋体，对晚期及隐性梅毒病人或口腔病灶材料也不适用。目前多应用染色法，常用的有银染色或刚果红染色。刮取损害表面渗出物，薄涂于洁净玻片上进行镀银染色，镀银染色能使梅毒螺旋体染成棕褐色或黑褐色，杨光河等［17］报道采用此法其阳性率可达97.3%，高出暗视野检查法，且染色层次清楚，反差明显，形态清晰，梅毒螺旋体易被着色辩认，封片后可永久保存标本，具有快速、简便和可靠的诊断价值，是早期梅毒的优选实验方法。而刚果红染色是取患者皮损处的组织渗出液直接印于玻片上进行染色。其染色方法简单、方便经济，技术易掌握，镜下菌体形态固定，易于观察、识别，特异性染色干扰影响少，唐书谦等［18］比较银染色法和刚果红染色法对早期梅毒患者进行梅毒螺旋体检查，发现银染色法的阳性率为50%，而刚果红染色法的阳性率为70%，认为刚果红染色法阳性率高于镀银染色法。及时对临床上出现的无痛性溃疡患者进行TP检测，对于早期梅毒的诊断很有必要。但银染色和刚果红染色不能观察梅毒螺旋体的运动方式，因此与类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。梅毒感染后可造成全身各个器官损害，其中骨骼是常见的受损部位，可造成干骺端、骨干、骨膜的破坏和增生，因此影像学检查可显示出异常。新生儿患者出生时约60%无症状，易漏诊，因此影像学检查对早期先天性梅毒感染的无症状婴幼儿有重要的诊断价值，但向葵等［19］报道检查阳性率不高，约为27.27%。随着日龄增加，骨损程度会加重，到婴儿期X线影像学检查阳性率明显提高。
确认试验检测的敏感性和特异性
梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)为目前国内医院常用的梅毒血清确认试验。是用生物细胞(火鸡或羊红细胞)做抗原载体，吸附从兔睾丸中提取的粗制梅毒螺旋体粉碎物抗原，检测血清中特异性梅毒螺旋体抗体。试剂制备过程中用兔睾丸提取物、兔血清及Reiter株做吸收剂，排除了各种非特异性反应，因此TPHA的敏感性和特异性较高。白雪梅等［20］对早期梅毒患者血清的检测方法进行比较时，发现TPHA的特异性接近或达到100%。缺点是试剂成本较高，不易保存，操作较麻烦，且易发生自凝现象和生物学假阳性。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)与TPHA试验不同，TPPA试验是将特异性梅毒螺旋体抗原包被在明胶颗粒上，省略了吸收剂，不受生物因素影响，与血清上的特异性抗体结合后出现肉眼可见的凝集反应，这种检测方法有着很高的敏感度和特异性，目前世界许多国家广泛使用IgMTPPA作为确证试验。Castro等［21］报道此法采用梅毒螺旋体天然抗原作为诊断抗原，其检出率可接近100%，特异性高，且操作较简便，结果清晰易判断，但价格昂贵和结果判断难以自动化等缺点限制了医院应用。荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTAABS）是采用非致病性密螺旋体提取物作为吸收剂吸收待检血清，排除了同属抗原的交叉结合，保证了试验结果的特异性;以整条梅毒螺旋体检测血清中抗体，确保各种抗原分子的完整存在，提高了试验的敏感性。但程艳杰等［13］在对252例梅毒患者血清进行几种检测方法比较时，认为其敏感性稍低于TPPA，且由于试验过程繁琐，技术要求高，需要荧光显微镜等诸多因素的存在，现只用于有争议的标本确认，临床常不开展此项检测。少数情况下也有出现生物学假阳性的报道［22］。梅毒螺旋体免疫蛋白印迹试验(WB)是20世纪80年展起来的一种检测技术，它结合了免疫学和分子生物学的特点，敏感性高，特异性强，能快捷准确检测血清内的IgM抗体。该试验是通过电泳转移硝酸纤维膜抗原条上含有梅毒螺旋体的各种成分来确认是否梅毒感染。梅毒螺旋体相对分子质量为47000的脂蛋白，具有特异的强免疫原性，其早期参与炎性反应。党倩丽等［23］对临床梅毒早期患者进行血清WB检测，结果显示相对分子质量为47000的条带最先出现阳性率为100%，认为相对分子质量为47000的条带对诊断早期梅毒有敏感且特异的价值。黄进梅等［24］也报道WB法对早期梅毒的检出率亦达到100%。认为WB法检测在早期梅毒的诊断中具有重要意义，WB还可用于胎传梅毒的诊断。免疫蛋白印迹法用于梅毒诊断优于FTAABS和TPHA方法，对于非螺旋体标本(包括正常标本、生物学假阳性标本以及γ球蛋白增高或抗核抗体的标本)检测没有假阳性或可疑反应，且操作简便，不要求试验仪器和环境，区带阴阳界限分明，结果容易判定。但成本太高，应降低硝酸纤维膜抗原条的制备过程，以降低成本。
梅毒在我国的发病率明显的增大，其流行对人类的的健康形成了严重的威胁，也给社会造成了巨大的压力，对梅毒患者的早期诊断已成为医务人员的首要任务。因此提高早期梅毒的确诊率，加强早期梅毒的诊断治疗，对梅毒的防治具有重要的临床意义。各实验可根据自身条件选择一种敏感性和特异性均高的检验方法，及早、准确地为早期梅毒的诊断提供重要的依据。以上各种试验各有优缺点，研究人员仍在寻找敏感、准确、全面的检测方法。
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